人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細胞；CCD-1095Sk價格質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

人乳腺浸潤性導(dǎo)管癌旁皮膚細胞；CCD-1095Sk價格操作步驟：

1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性  成纖維細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  此株細胞從左乳房的活體組織切片的正常皮膚建立。 病人患有乳腺浸潤性導(dǎo)管癌并患有乳頭濕疹樣癌本病。 這一代次的細胞已經(jīng)過兩次數(shù)目倍增，約可再進行10次數(shù)目倍增。  
培養(yǎng)條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 P(1+5)
凍存條件  *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

次(亞)甲基蘭    10g
次黃嘌呤    1g
次甲基綠    1g
D- 阿拉伯糖    10g
D- 氨基半乳糖鹽酸鹽    250mg
D- 氨基葡萄糖鹽酸鹽    10g
D- 氨基酸氧化酶    5 mg
D- 半乳糖    25g
D- 半乳糖醛酸    1g
D- 泛酸鈣    50g
D- 甘露    250g
D- 甘露糖    5g
D- 果糖    250g
D- 果糖 -1,6- 二磷酸鈉鹽    100mg
D- 果糖 -6- 磷酸二鈉    100mg
D- 海藻糖    5g
D- 核糖    5g9（S）-HODE-d4 （25 ug）9S-hydroxy-10E，12Z-octadecadienoic-9，10，12，13-d4 acid； 9（S）-HODE-d4
8（S），15（S）-DiHETE （25 ug）8S，15S-dihydroxy-5Z，9E，11Z，13E-eicosatetraenoic acid； 8（S），15（S）-DiHETE
ω-3 Arachidonic Acid-d8 （5 mg）8Z，11Z，14Z，17Z-eicosatetraenoic-8，9，11，12，14，15，17，18-d8 acid； ω-3 AA-d8； ω-3 Arachidonic Acid-d8
8-Isoprostane Affinity Column （4 ml） （1 ea）8-epi Prostaglandin F2α|8-iso Prostaglandin F2α； 8-Isoprostane Affinity Column （4 ml）
Rabbit Anti-Sheep IgG Precoated Solid Plate （5 ea）Rabbit Anti-Sheep IgG Precoated Solid Plate
17-phenyl trinor Prostaglandin F2α EIA Antiserum （100 dtn）Bimatoprost EIA Antiserum； 17-phenyl trinor Prostaglandin F2α EIA Antiserum
15（S）-HpEDE （100 ug）15S-hydroperoxy-11Z，13E-eicosadienoic acid； 15（S）-HpEDE
sPLA2 （human Type IIA） EIA Standard （1 ea）Secretory Phospholipase A2 （human synovial）； sPLA2 （human Type IIA） EIA Standard
SEAP Substrate （Luminescence） （15 mL）SEAP Substrate （Luminescence）
TBS Stock Solution （10X， pH 7。4） （1 L）Tris-buffered Saline； TBS Stock Solution （10X， pH 7。4）
2-O-methyl PAF C-16 （50 mg）1-O-hexadecyl-2-O-methyl-sn-glyceryl-3-phosphorylcholine； 2-O-methyl PAF C-16
2-Arachidonyl Glycerol ether （25 mg）5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraen-2-glyceryl ether； 2-AG ether|Noladin； 2-Arachidonyl Glycerol ether
Oleyl Trifluoromethyl Ketone （5 mg）1，1，1-trifluoro-10Z-nonadecen-2-one； OTK|Heptadecyl Trifluoromethyl Ketone； Oleyl Trifluoromethyl Ketone
DMSO Assay Reagent （1 ml）DMSO Assay Reagent
D- 棉子糖    10g
D- 葡萄糖 -1- 磷酸二鈉    1g
D- 山梨    250g
D- 生物素 ( 維生素 H)    1g
D- 無水葡萄糖    250g