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技術(shù)文章
轉(zhuǎn)化細胞周期測定實驗
2018
6-21實驗方法原理體外培養(yǎng)轉(zhuǎn)化細胞生長、分裂繁殖的能力，可用分裂指數(shù)來表示。它與生長曲線有一定的，如隨著分裂指數(shù)的不斷提高，細胞也就進入了指數(shù)生長期。分裂指數(shù)指細胞群體中分裂細胞所占的百分比，它是測定細胞周期的一個重要指標，也是不同實驗研究選擇細胞的重要依據(jù)。實驗材料細胞試劑、試劑盒胰酶甲醇培養(yǎng)液冰醋酸Giemsa染液儀器、耗材CO2培養(yǎng)箱普通顯微鏡培養(yǎng)皿蓋玻片吸管實驗步驟一、消化細胞，將細胞懸液接至內(nèi)含蓋玻片的培養(yǎng)皿中。二、CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時，使細胞長在蓋片上。三、取出蓋...+ -
技術(shù)文章
ATCC細胞身份維持著
2018
6-19在許多后生動物的發(fā)育早期ATCC細胞即從體細胞譜系中分離出來，并終身維持生殖系細胞身份。現(xiàn)在，來自約翰霍普金斯大學(xué)的研究人員報告稱，發(fā)現(xiàn)負責(zé)生成抑制性染色質(zhì)標記H3K27me3的一種組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶果蠅多梳家族蛋白Enhancerofzeste(E(z))，以一種非細胞自主方式維持了生殖細胞的身份。研究人員對成體果蠅睪丸進行了分析，成體睪丸中包含有有絲分裂后包囊細胞（cystcell）以及睪丸頂端的另外兩種體細胞——中心細胞（hubcell）和與生殖干細胞（GermlineS...+ -
技術(shù)文章
如何“石化”轉(zhuǎn)化細胞
2018
6-14以硅為基礎(chǔ)，能將活轉(zhuǎn)化細胞變?yōu)椴粫癄€的材料，使其耐受高能探針的檢測，在癌癥、干細胞等生物學(xué)領(lǐng)域有著廣闊的應(yīng)用前景。將體外培養(yǎng)的組織細胞浸入硅溶液，進行**硬化。隨后他們提高溫度燒掉了其中的生物物質(zhì)，結(jié)果得到了的細胞復(fù)制品。研究人員用電鏡檢測了細胞內(nèi)部，發(fā)現(xiàn)這一技術(shù)很好的復(fù)制了微觀細胞器，建立了幾乎的硅復(fù)制品（從整體形狀到納米結(jié)構(gòu)）。硅漿處理有助于人們進一步檢測癌癥發(fā)展和細胞生長。這一技術(shù)不需要繁瑣的“固定”過程，能夠很好的穩(wěn)定生物材料，防止它們在電子束分析時崩潰.建立干細胞...+ -
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ATCC細胞轉(zhuǎn)化操作流程及提高轉(zhuǎn)化效率
2018
6-121、ATCC細胞在冰上預(yù)冷2支14-mlBDFalcon聚丙烯圓底離心管。1支用來轉(zhuǎn)化樣品，1支做pUC18對照。同時將NZY+broth培養(yǎng)基在42°C預(yù)熱。2、冰上融化感受態(tài)細胞。融化時輕輕將細胞混勻并分裝成100ul/管。3、每管中加入隨試劑盒提供的4mlb-ME（巰基乙醇）。4、溫和轉(zhuǎn)動試管，將細胞在冰上放置10分鐘，每2分鐘溫和轉(zhuǎn)動一下。5、每管細胞加入0.1–50ng樣品DNA（或2ml連接反應(yīng)物）（參見DNA質(zhì)量與體積說明。）用滅菌dH2O水按1:10稀釋對照p...+ -
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轉(zhuǎn)化細胞命運調(diào)控的認識
2018
6-7轉(zhuǎn)化細胞處于某一特定狀態(tài)時，它會選擇性閱讀與該細胞相關(guān)的所有信息，同時要屏蔽其它不需要的信息。將體細胞誘導(dǎo)為多能干細胞（俗稱的“細胞水平返老還童”）是探索這種機理的理想體系。成纖維細胞在導(dǎo)入誘導(dǎo)因子后，會啟動一套奇妙的未知程序，將體細胞返老還童到受精后約3-5天的狀態(tài)。過去10年來，*的科學(xué)家都在研究這一奇妙的過程，得到的成果極大地豐富了人類對細胞命運調(diào)控的認識。但目前對這一過程的了解主要以觀察變化的現(xiàn)象為主，并沒有從中抽象出具有普遍性邏輯或者規(guī)律。在該研究中，科研人員采用A...+ -
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ATCC細胞污染的預(yù)防
2018
6-5預(yù)防是防止ATCC細胞培養(yǎng)過程中發(fā)生污染的辦法。只有預(yù)防工作做在前，才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手：1、添加抗生素2、從物品、用品消毒滅菌著手細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在無菌試驗陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔消毒滅菌。3、從操作者做起(1)進無菌室前要用肥皂洗手，按規(guī)定穿隔離衣。工作開始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。(2)操作者動作要輕，必須在火焰周圍無菌區(qū)內(nèi)打開瓶口，并將瓶口...+ -
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ATCC細胞轉(zhuǎn)移實驗服務(wù)
2018
5-31ATCC細胞誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移將Transwell小室放入培養(yǎng)板中，小室內(nèi)稱上室，培養(yǎng)板內(nèi)稱下室，上室內(nèi)盛裝上層培養(yǎng)液，下室內(nèi)盛裝下層培養(yǎng)液，上下層培養(yǎng)液以聚碳酸酯膜相隔。我們將細胞種在上室內(nèi)，由于聚碳酸酯膜有通透性，下層培養(yǎng)液中的成分可以影響到上室內(nèi)細胞的運動方向，從而可以研究下層培養(yǎng)液中的成分對細胞生長、運動等的影響。常用有普通transwell小室（用于遷移實驗）和鋪有基質(zhì)的transwell小室（用于侵襲實驗）。應(yīng)用實例：1、遷移實驗：遷移實驗通常選擇帶有8.0µm...+ -
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干細胞溶解操作方法及注意事項
2018
5-29干細胞因子中不含載體蛋白（CarrierProtein）或其他添加劑（如BSA、HAS或蔗糖等），并且通常以zui少量的鹽來進行凍干處理，因此微量的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內(nèi)，形成很薄或不可見的蛋白層。所以我們建議在收到產(chǎn)品后，務(wù)必在開蓋前先離心，使粘在管蓋或管壁上的蛋白聚集于管底（此時能否見到白色沉淀均屬正常現(xiàn)象）。1．離心：高速離心(10,000rpm)20-30秒，或低速離心(2,000rpm)5分鐘。2．溶解（Reconstitution）：用去離子水或其它緩沖...+ -
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新老ATCC細胞之間的競爭關(guān)系
2018
5-24在胸腺中，ATCC細胞從前體細胞形成，后者不斷被新到達的骨髓祖細胞取代。ELISA試劑盒Hans-ReimerRodewald及同事發(fā)現(xiàn)，這是“老"細胞與“新"細胞之間競爭的結(jié)果。在沒有細胞競爭的情況下，當(dāng)新骨髓祖細胞的流入在小鼠體內(nèi)被阻斷時，老細胞就會重新獲得自我更新并zui終被改變的能力，導(dǎo)致“T-細胞急性淋巴細胞性白血病"(T-ALL)的發(fā)生，ELISA試劑盒與人類的這種白血病相似。研究表明，細胞運動依賴于偽足的邊緣凸起、粘著和恢復(fù)來實現(xiàn)。可以看到細胞核在受到肌肉細胞組...+ -
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干細胞技術(shù)離臨床應(yīng)用有多遠？
2018
5-22在利用干細胞進行組織修復(fù)方面，如今科學(xué)家們已經(jīng)取得了一定的研究成果。MehrnooshSaghizadeh等人發(fā)現(xiàn)，利用干細胞或能改善眼角膜的傷口愈合，眼角膜的傷口愈合是一個復(fù)雜的過程，其往往會對多種眼部損傷和外科手術(shù)產(chǎn)生反應(yīng)，研究人員提出了證據(jù)闡明了干細胞在眼角膜傷口愈合過程中所扮演的關(guān)鍵角色，同時還揭示了干細胞移植如何用來精細地調(diào)節(jié)傷口的愈合過程，這或為患者能帶來一定健康益處。戴建武等人研制處了能特異結(jié)合生長因子或干細胞的智能生物材料，并在世界上開展了神經(jīng)再生膠原支架修復(fù)...+ -
技術(shù)文章
如何提高干細胞的營養(yǎng)條件？
2018
5-17現(xiàn)在隨著科技技術(shù)的發(fā)達，可以人工提取并培養(yǎng)干細胞，從而對其進行更加深入的研究和試驗，以解決一些疾病的治療問題。那么為了獲得的骨髓間充質(zhì)干細胞，專業(yè)的培養(yǎng)機構(gòu)會使用一些方法來提高骨髓間充質(zhì)干細胞的營養(yǎng)條件，確保其能夠更好的生長，下面小編就來為大家簡單介紹如何提高培養(yǎng)時的細胞營養(yǎng)條件。1、選擇合適的培養(yǎng)基培養(yǎng)基是細胞人工培養(yǎng)繁殖過程中的重要工具，能夠為細胞提供有力的生存所需的基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)，為了能提高細胞的營養(yǎng)，專業(yè)的骨髓間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)機構(gòu)會選擇zui合適的培養(yǎng)基，從而確保細胞在...+ -
技術(shù)文章
轉(zhuǎn)化細胞凍存液的配制方法
2018
5-15轉(zhuǎn)化細胞凍存是細胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實驗順利進行的重要技術(shù)手段。在細胞建株和建系中，及時凍存原始細胞是十分重要的。在雜交瘤單克隆抗體的制備過程中，雜交瘤細胞、每次克隆化得到的亞克隆細胞的凍存保種常常是*的實驗操作。因為在沒有建立一個穩(wěn)定的細胞系或穩(wěn)定分泌抗體的細胞系的時候，細胞的培養(yǎng)過程中隨時可能因細胞的污染、分泌抗體能力的喪失或遺傳變異等導(dǎo)致實驗失敗，如果沒有原始細胞的凍存，則因為上述的意外而前功盡棄。1、常用凍存液組成成分20％血清（FBS）、10％DMSO、70％1...+
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