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技術(shù)文章
小鼠elisa檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)的幾點(diǎn)問題
2018
8-17小鼠elisa檢測試劑盒新的一年又開始了！又是新的一月，我公司當(dāng)然也有新的東西要分享給大家，下面我們一起來看看盤點(diǎn)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的哪些事兒。在使用之前，要將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件，可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測方法。1.雙抗體夾心法2.雙位點(diǎn)一步法3.間接法測抗體4.競爭法5.捕獲法測IgM抗體6.應(yīng)用親和素和生物素普遍用作非放射性同位素的成鍵化驗(yàn)。在這種方法中，通常標(biāo)準(zhǔn)...+ -
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小鼠elisa檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)之顯色
2018
8-14小鼠elisa檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)中顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng)，此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素。在一定時(shí)間內(nèi)，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時(shí)間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行。在定量測定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行，時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制，有時(shí)可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時(shí)間，及時(shí)判斷。OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即...+ -
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大鼠elisa檢測試劑盒檢測重組蛋白的
2018
8-9大鼠elisa檢測試劑盒采用RT-PCR擴(kuò)增出大小409bp豬繁殖與呼吸綜合征病毒核衣殼蛋白基因（PRRSVNgene）,將該基因克隆到表達(dá)載體pGEX-KG,構(gòu)建重組表達(dá)載體pGEX-KG-N,轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株BL21（DM3）誘導(dǎo)表達(dá),經(jīng)SDS-PAGE和Westernblot分析表明,重組N蛋白獲得了表達(dá),融合蛋白相對分子質(zhì)量為41000,并具有良好的免疫學(xué)活性。ELISA試劑盒置4℃前提保留12個(gè)月,試劑盒不亂性無顯著改變。研制的ELISA試劑盒為PRRSV臨床血清抗體檢...+ -
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小鼠elisa檢測試劑盒手工測定的影響因素
2018
8-7小鼠elisa檢測試劑盒法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn)，并具有操作簡便、無放射性危害的優(yōu)點(diǎn)，因而多年來廣泛應(yīng)用于血站和醫(yī)院的實(shí)驗(yàn)室中，但在測定中常會出現(xiàn)一些誤差和問題。我們通過幾年的實(shí)驗(yàn)觀察，認(rèn)為影響結(jié)果的因素有如下方面。1試劑盒（1）抗原、抗體活性對效價(jià)的影響：主要是試劑中抗體（或抗原）的效價(jià)降低或失活，結(jié)果不易判斷。再有ELISA法靈敏度高，對雜質(zhì)的反應(yīng)靈敏度也高，實(shí)驗(yàn)中空白對照OD值偏高或假陽性。（2）酶結(jié)合物濃度過高，也會導(dǎo)致OD值假性增高。2試驗(yàn)儀器（1）...+ -
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞質(zhì)量和可塑性
2018
8-2在轉(zhuǎn)化細(xì)胞內(nèi)葡萄糖的代謝對于胰島素基因表達(dá)和胞外分泌的賀爾蒙來說是很關(guān)鍵的一環(huán)，但是有越來越多的證據(jù)顯示，葡萄糖代謝途徑同時(shí)對于β-細(xì)胞發(fā)育和維持成年人的β細(xì)胞質(zhì)量非常重要。在小鼠β細(xì)胞中針對葡萄糖激酶剃除后不僅防止了葡萄糖所刺激的胰島素分泌，而且也抑制了β細(xì)胞的增殖，并與細(xì)胞凋亡的增加有關(guān)聯(lián)。在組織培養(yǎng)中，直接操縱胚胎胰臟的葡萄糖可用性實(shí)驗(yàn)則顯示了轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子神經(jīng)元素3(Neurog3)和NEUROD對于α和β細(xì)胞的發(fā)育是很必要的存在。針對此主題，帕特爾等人的論文提到丙酮酸...+ -
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)小技巧
2018
7-31轉(zhuǎn)化細(xì)胞培養(yǎng)的路上，有多虐心就有多少要注意的地方。大家擦干眼淚，聽小納君說幾句，希望下面這幾點(diǎn)建議可以幫助你在細(xì)胞培養(yǎng)的路上，少一點(diǎn)污染，多一點(diǎn)快樂！細(xì)胞方面1.不管是買的細(xì)胞，還是別人惠贈的細(xì)胞，剛拿到手趕緊的做兩件事：檢測是否有支原體污染；迅速擴(kuò)增凍存，凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天更換一次培養(yǎng)基。2.發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。細(xì)菌污染、真菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話，細(xì)胞會長的慢，可以買個(gè)支原體檢測的試劑盒定期檢測一下。3.不同細(xì)胞生長周期不同。有...+ -
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ATCC細(xì)胞新的研究方向和思路
2018
7-26ATCC細(xì)胞是一群具有分化多能性、位于心臟外層的細(xì)胞，研究發(fā)現(xiàn)其可分化成纖維細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞甚至心肌細(xì)胞，但其轉(zhuǎn)化成脂肪細(xì)胞的能力鮮有報(bào)道。研究探索心外膜脂肪的起源，可為心臟冠狀動脈疾病的診斷和治療提供新的研究方向和思路。博士生劉巧珍等利用轉(zhuǎn)基因小鼠特異性標(biāo)記追蹤心外膜細(xì)胞發(fā)育的命運(yùn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，胚胎期標(biāo)記的心外膜細(xì)胞除了分化成冠狀血管平滑肌細(xì)胞外，還可形成心臟房室之間的脂肪細(xì)胞。但在成體中再度標(biāo)記心外膜時(shí)卻觀察不到，這表明成體穩(wěn)態(tài)中心外膜轉(zhuǎn)變成脂肪的能力被抑制。研究證明成...+ -
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控制ATCC細(xì)胞分裂是什么呢？
2018
7-24研究人員發(fā)現(xiàn)了一種能夠控制ATCC細(xì)胞分裂的特殊酶類（DYRK3），這類酶是一種雙特異性的激酶，當(dāng)細(xì)胞分裂時(shí)，DYRK3酶就會促進(jìn)不同相的混合，這就保證了細(xì)胞能夠正確構(gòu)建分離染色體及分裂細(xì)胞內(nèi)容物的細(xì)胞機(jī)器，當(dāng)細(xì)胞分裂后，酶類DYRK3就會被破碎，而且單一相就會再次形成。如果一切按照計(jì)劃進(jìn)行的話，遺傳物質(zhì)、細(xì)胞器以及細(xì)胞內(nèi)容物就會在子代細(xì)胞中被正確分配，這些基礎(chǔ)性的研究發(fā)現(xiàn)或許就能幫助研究人員深入理解細(xì)胞分裂的過程。研究者LucasPelkmans表示，細(xì)胞中的物理-化學(xué)過程...+ -
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ATCC細(xì)胞如何指導(dǎo)分裂
2018
7-19ATCC細(xì)胞需要的了解其周圍的環(huán)境，來自一個(gè)方向的信號也許會導(dǎo)致細(xì)胞作出針對其它方向信號*不同的應(yīng)答。然而不幸的是，對于研究人員來說，這些關(guān)鍵的方向線索在他們將細(xì)胞從天然環(huán)境中取出，放到營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子的人工培養(yǎng)基里的時(shí)候，就已經(jīng)丟失了。來自美國斯坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)院和霍華德休斯醫(yī)學(xué)院的研究人員近期出了一種新方法，能模擬正常細(xì)胞空間環(huán)境的信號傳導(dǎo)。利用這種方法，研究人員發(fā)現(xiàn)在人類胚胎干細(xì)胞細(xì)胞膜上有一種“現(xiàn)在進(jìn)行分裂”信號，這種信號的位置能調(diào)控細(xì)胞平面分裂開始的位置。而且這也決定...+ -
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干細(xì)胞生理活動的觀察
2018
7-12實(shí)驗(yàn)方法原理干細(xì)胞是機(jī)體防御系統(tǒng)中能游走的單位。它分為粒細(xì)胞系、單核細(xì)胞系、淋巴系三類。它們有許多生理功能，如游走性、變形運(yùn)動、趨化性、吞噬異物等。在白細(xì)胞中，以粒細(xì)胞、單核細(xì)胞的吞噬活動較強(qiáng)，故稱此二類細(xì)胞為吞噬細(xì)胞。單核細(xì)胞由血液進(jìn)入組織后逐漸演變成巨噬細(xì)胞。吞噬細(xì)胞主要靠吞噬來處理異物。吞噬細(xì)胞首先由于趨化作用而向異物游走，然后伸出偽足包圍異物，并發(fā)生內(nèi)吞作用形成吞噬泡將異物吞入細(xì)胞，繼而溶酶體與吞噬泡融合消化異物。實(shí)驗(yàn)材料小白鼠試劑、試劑盒臺盼蘭剛果紅儀器、耗材光鏡注...+ -
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ATCC細(xì)胞傳代后形態(tài)不正常原因
2018
7-5血清是一種成分復(fù)雜的混合物，且對ATCC細(xì)胞生長具有促進(jìn)作用，我們培養(yǎng)細(xì)胞離不開血清。那在大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)中由血清引起的細(xì)胞生長狀態(tài)不佳及病毒滴度的影響都有哪些表現(xiàn)？1、細(xì)胞生長速度緩慢，長滿單層時(shí)間長；從同一細(xì)胞瓶中分出兩瓶細(xì)胞，用同一種培養(yǎng)液，分別加入10％的對照血清和待檢血清，在相同條件下培養(yǎng)72小時(shí)，會出現(xiàn)對照血清長滿單層，而待檢血清大約只有60～70％，這種血清就不適合用來大規(guī)模培養(yǎng)細(xì)胞。2、細(xì)胞傳代后形態(tài)不正常，細(xì)胞狀態(tài)發(fā)生變化；由于血清的質(zhì)量問題，使原本狀態(tài)正常的...+ -
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ATCC細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則
2018
7-3ATCC細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實(shí)驗(yàn)證明這樣可以zui大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑，這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外，減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法，這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)、引種、保種和保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的重要技術(shù)手段。在細(xì)胞建株和建...+
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