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如何選擇細(xì)胞培養(yǎng)的冷凍保護(hù)劑?
轉(zhuǎn)化細(xì)胞冷凍保護(hù)劑是指可以保護(hù)細(xì)胞免受冷凍損傷的物質(zhì)。冷凍保護(hù)劑常常配制成一定的溶液。一般來講,只有紅細(xì)胞、大多數(shù)微生物和極少數(shù)有核的哺乳動(dòng)物細(xì)胞懸浮在不加冷凍保護(hù)劑的水或簡單的鹽溶液中,并以zui適的冷凍速率冷凍,可以獲得活的凍存物。但對(duì)于大多數(shù)有核哺乳動(dòng)物細(xì)胞來說,在不加冷凍保護(hù)劑的情況下,無zui適冷凍速率可言,也不能獲得活的冷凍物。例如將小鼠骨髓細(xì)胞懸浮在不加冷凍保護(hù)劑的平衡鹽溶液中,并以0.3~600℃/min的冷凍速率降溫冷凍,98%以上的細(xì)胞會(huì)死亡;而加入甘油冷...
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞的原理
1、轉(zhuǎn)化細(xì)胞簡介轉(zhuǎn)化細(xì)胞菌屬于[1]光合細(xì)菌(英文縮寫PSB)的一種,是地球上zui古老的微生物之一。PSB菌體營養(yǎng)豐富,蛋白質(zhì)含量高達(dá)65%,且富含多種生物活性物質(zhì),并具有適應(yīng)性強(qiáng),能耐受高濃度的有機(jī)廢水和較強(qiáng)的分解轉(zhuǎn)化能力,對(duì)酚、氰等毒物也有一定的耐受和分解能力等特點(diǎn)。2分類轉(zhuǎn)化細(xì)胞的分類:按照《伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)》(1974年第8版)將光合作用不產(chǎn)氧的光合細(xì)菌列為細(xì)菌門真細(xì)菌綱紅螺菌目(Rhodospirillales)。紅螺菌目下分紅螺菌亞目(Rhodospirilli...
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造血干細(xì)胞的再生能力
干細(xì)胞發(fā)現(xiàn)于骨髓,這些細(xì)胞能夠進(jìn)行自我更新也可以通過分化形成任意血細(xì)胞類型。健康的免疫系統(tǒng)依賴于造血干細(xì)胞的再生能力。化療和放療等常見的癌癥治療方法會(huì)在殺死癌細(xì)胞的同時(shí)損傷造血干細(xì)胞,影響血液再生和病人的免疫系統(tǒng),導(dǎo)致病人需要經(jīng)歷更加漫長和復(fù)雜的恢復(fù)過程。之前曾有研究表明一些基因可以改變?cè)煅杉?xì)胞的再生能力,加速或阻礙免疫系統(tǒng)的重建,但是需要更多研究進(jìn)一步找出這些基因的活性和作用。其中一項(xiàng)新研究鎖定在造血干細(xì)胞表達(dá)的Grb10基因。Grb10的功能在此之前了解較少,為了了解它...
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全面提高細(xì)胞抗氧化能力
ATCC細(xì)胞衰老的氧化假說——也稱自由基假說,是由1956年DenhamHarman提出的。從那時(shí)起,很多試圖證明衰老與氧化損傷關(guān)系的努力都失敗了,包括抗氧化物相關(guān)的多個(gè)臨床試驗(yàn)。因此,雖然在衰老過程中氧化損傷的積累顯而易見,大多數(shù)科學(xué)家仍然認(rèn)為其與衰老的成因幾乎不相干。為了達(dá)到抗氧化能力的整體提高,研究人員聚焦于提高NADPH的水平。NADPH是抗氧化反應(yīng)中起關(guān)鍵作用的一個(gè)相對(duì)簡單的分子。到目前為止其他人并沒有將NADPH的研究與衰老起來。研究人員利用基因手段提高的NADP...
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ATCC細(xì)胞原蟲污染原因
培養(yǎng)液可輕微渾濁,在顯微鏡下細(xì)小的點(diǎn)狀物數(shù)量非常多,輕微活動(dòng),ATCC細(xì)胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細(xì)胞狀態(tài)不好,邊緣不清楚,細(xì)胞不透亮。他們與細(xì)胞可共生但會(huì)與細(xì)胞爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的,但他們的數(shù)量小,細(xì)胞占優(yōu)勢所以不會(huì)影響到細(xì)胞的正常生長,只有當(dāng)他們到達(dá)一定的數(shù)量時(shí)就會(huì)影響到細(xì)胞的生長,zui終形成惡性循環(huán)。ATCC細(xì)胞污染的可能原因:配液消毒問題、操作問題、環(huán)境問題等等。關(guān)于培養(yǎng)基的無菌狀況,取培養(yǎng)基至培養(yǎng)瓶中(不加細(xì)胞),37度試培養(yǎng)一段時(shí)間后觀察...
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掌握ATCC細(xì)胞培養(yǎng)溫度的具體內(nèi)容
不論是哪一種實(shí)驗(yàn),從試劑到操作,溫度都是其中的一個(gè)要點(diǎn)。我司教您如何掌握好ATCC細(xì)胞培養(yǎng)溫度,能干使得實(shí)驗(yàn)又上一層樓哦!下面一起來看具體內(nèi)容:朋友們要知道,高溫對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)不利。高溫主要引起酶的滅活、類脂質(zhì)破壞、核分裂的破壞。產(chǎn)生凝固酶使細(xì)胞發(fā)生凝固,使蛋白質(zhì)變性,體外培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)一定要避免高溫。一般哺乳類及禽類細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度是37~38℃,細(xì)胞耐受低溫的能力比抗熱的能力強(qiáng),在低溫下的代謝活力及核分裂降低。溫度低于0℃時(shí)會(huì)影響細(xì)胞代謝,但并無傷害作用。置于23~25℃(...
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基因治療是攻克威脅人類健康的重大疾病
基因是具有遺傳效應(yīng)的DNA片段,基因治療就是通過糾正患病細(xì)胞缺陷基因或者調(diào)控轉(zhuǎn)化細(xì)胞內(nèi)特定蛋白因子的表達(dá)而發(fā)揮作用,它被認(rèn)為是攻克威脅人類健康的重大疾病,如癌癥、帕金森癥等應(yīng)用前景的治療手段。基因治療構(gòu)造的核酸分子在遞送過程中非常容易被對(duì)應(yīng)的DNA酶降解,因此要用基因載體將目的基因包裹起來,防止被酶降解,被包裹的基因到達(dá)細(xì)胞質(zhì)之后,基因載體還應(yīng)將核酸分子釋放出來,讓其表達(dá)。高分子量聚陽離子是目前應(yīng)用的基因載體之一,但其高細(xì)胞毒性限制了它的臨床應(yīng)用,且其本身帶有大量正電荷,在人...
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成體干細(xì)胞是分化能力稍遜于胚胎干細(xì)胞的一類重要干細(xì)胞
成體干細(xì)胞是分化能力稍遜于胚胎干細(xì)胞的一類重要干細(xì)胞,存在于成年機(jī)體內(nèi),可以不斷分化并修復(fù)受損組織、替代凋亡細(xì)胞等。科研人員此前曾報(bào)告在毛囊、肝臟、肌肉等組織或器官中發(fā)現(xiàn)過成體干細(xì)胞,但從未在腦垂體中發(fā)現(xiàn)這種干細(xì)胞。垂體是大腦內(nèi)分泌激素的腺體。人腦內(nèi)的垂體大小僅如豌豆,分泌的激素負(fù)責(zé)調(diào)控體內(nèi)各處的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。老鼠的垂體從胚胎階段即開始發(fā)育,但出生幾星期后,垂體還會(huì)經(jīng)歷第2個(gè)發(fā)育高峰期。每一個(gè)干細(xì)胞都能分化出這6個(gè)干細(xì)胞系并分泌不同的激素。科學(xué)家說,正是這類干細(xì)胞不斷分化,使得實(shí)...
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理解造血干細(xì)胞的發(fā)育起源
在發(fā)育中的胚胎里造血干細(xì)胞的直接前體細(xì)胞存在分子標(biāo)記Ly6a,從而為利用細(xì)胞工程技術(shù)讓前體細(xì)胞造血干細(xì)胞提供極其需要的新啟示。因?yàn)樵诔赡瓴溉閯?dòng)物骨髓中發(fā)現(xiàn)的造血干細(xì)胞能夠產(chǎn)生身體所有血細(xì)胞類型,解開它們來源的秘密可能有助于更好地操縱胚胎干細(xì)胞產(chǎn)生新的血細(xì)胞用于治療。發(fā)育生物學(xué)教授Speck說,“干細(xì)胞治療的zui終目標(biāo)是提取前體干細(xì)胞,并將它們分化為某種特定細(xì)胞系來替換成人或小孩身上生病或死亡的細(xì)胞。”以前的研究表明造血干細(xì)胞來源于血管上一小群稱作內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞。但是,人們?nèi)?..
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胚胎干細(xì)胞被研究用于再生細(xì)胞或組織移植
研究人員發(fā)現(xiàn),來源于胚胎干細(xì)胞的組織可對(duì)免疫系統(tǒng)產(chǎn)生作用,進(jìn)而防止病患產(chǎn)生排斥反應(yīng)。于愛丁堡召開的英國國家干細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)科學(xué)年會(huì)上,與會(huì)代表聽取了研究成果報(bào)告,認(rèn)為該成果可能意味著會(huì)在細(xì)胞層面上發(fā)現(xiàn)新的治療方法。干細(xì)胞本身具有自我更新和分化潛能,而胚胎干細(xì)胞作為干細(xì)胞的一種生存階段,能分化出包括生殖細(xì)胞在內(nèi)的所有組織和器官,具有發(fā)育的全功能性,因此被稱之為細(xì)胞。根據(jù)其特性,胚胎干細(xì)胞被研究用于再生細(xì)胞或組織移植,亦可作為一種損壞或患病組織替代治療的資源。目前已有實(shí)驗(yàn)利用胚胎干細(xì)胞...
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利用熒光成像來追蹤多種疾病種關(guān)鍵酶類的活動(dòng)
研究人員通過研究開發(fā)了一種新技術(shù),利用熒光成像來追蹤多種疾病腫瘤細(xì)胞種關(guān)鍵酶類的活動(dòng),包括癌癥、遺傳性疾病和腎臟疾病。這項(xiàng)新技術(shù)或有望幫助研究人員開發(fā)治療癌癥、炎癥以及腎臟疾病的新型療法。本文研究還為科學(xué)家們提供了一種診斷工具幫助診斷疾病,并且?guī)椭鷮I(yè)技術(shù)人員測定藥物療法治療疾病的效率。文章中,研究者們對(duì)一種在轉(zhuǎn)移性癌癥中出現(xiàn)的關(guān)鍵酶類—乙酰肝素酶進(jìn)行研究,同時(shí)他們成功利用新型的成像制劑對(duì)健康和疾病組織中乙酰肝素酶的活性進(jìn)行了檢測。此前研究人員解析了乙酰肝素酶的三維結(jié)構(gòu),這種...
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維生素A對(duì)造血干細(xì)胞產(chǎn)生直接影響
骨髓中存在一群非常特殊的成體干細(xì)胞,即造血干細(xì)胞。造血干細(xì)胞在大多數(shù)時(shí)間里處于休眠狀態(tài),而且僅在細(xì)菌感染、病毒感染、嚴(yán)重失血或者接受化療等緊急情況下才活躍起來。一旦它們的工作完成,身體就讓這些充滿潛能的造血干細(xì)胞重返休眠狀態(tài)。研究人員認(rèn)為這可以防止它們可能產(chǎn)生導(dǎo)致白血病的危險(xiǎn)突變。在這篇文章發(fā)表之前,激活這些特殊的干細(xì)胞的機(jī)制和讓在它們完成工作后返回休眠狀態(tài)的機(jī)制仍然是未知的。如今,研究人員鑒定出視黃酸(維生素A的一種代謝物)是這種過程一種至關(guān)重要的因子。如果缺乏視黃酸,那么...
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