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ATCC細胞培養及外源基因導入的實驗步驟
ATCC細胞的傳代培養(*天)1)顯微鏡觀察母細胞的生長狀態,確定傳代比例。為了獲得較高的轉染效率,必需保證細胞處于合適的生長密度,因此應根據母細胞的生長密度調整傳代比例。磷酸鈣轉染的合適細胞密度為50%-70%,本實驗中使用的293細胞長成致密單層后一般按照1:6傳代即可。2)在酒精燈旁打開培養皿蓋,倒去皿中的細胞營養液,加入2mlHank’s液,輕輕搖動,將溶液倒出。3)消化與分裝。在培養皿中加入1ml消化液(0.53mMEDTA,0.05%胰蛋白酶液),37°C靜置5分...
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ATCC細胞多功能性
ATCC細胞——可以轉化為人體的各種組織,來產生腸道類器官。該研究小組將從皮膚和血樣中提取的成人細胞,轉化成“空白”的iPSCs,然后,將干細胞置于一種特殊的分子雞尾酒中,這樣它們就會形成腸道類器官。然后,研究人員將這種人類移植到小鼠的腎臟囊體中,提供一種必要的血液供應,使類器官細胞發育成為*成熟的人類腸道組織。研究人員指出,這一步是再生醫學的一個主要進步性標志,世界各地的科學家已經為之奮斗了許多年。研究中使用的小鼠,通過基因工程改造,它們的免疫系統會接受人體組織的引入。根據...
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ATCC細胞分裂的特殊需求
ATCC細胞基因之中不僅含有蛋白的編碼,還含有被稱為內含子的序列,這些序列不是蛋白所需的,會在蛋白合成之前被切除。研究人員降低了細胞切除內含子的效率,發現只有在胚胎發育早期表達的基因發生了讀取故障,而這正是細胞快速分裂的時候。研究人員在此基礎上推測,高度增殖的組織需要在短時間內表達基因和合成蛋白,而內含子切除是一個耗費時間的過程,很容易出現問題。為了驗證這一理論,他們向果蠅的早期胚胎引入了多重內含子,這是一種包含基因的非典型內含子。研究顯示,快速分裂的細胞無法有效加工其中的基...
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干細胞進行循環的重要過程
干細胞自噬是真核生物中進化保守的對細胞內物質進行循環的重要過程。在該過程中,一些損壞的細胞質蛋白或細胞器被自噬小泡包裹后,送入溶酶體(動物)或液泡(酵母和植物)中降解并得以循環利用。劉玉樂等zui早報道細胞自噬參與植物免疫,然而其機制一直不清楚。在這項研究中,研究人員發現細胞自噬可通過自噬蛋白ATG8與木爾坦棉花曲葉病毒(CottonleafcurlMultanvirus,CLCuMuV)衛星分子編碼的βC1蛋白互作,進而降解βC1,從而起到抑制病毒復制的作用。βC1上第32...
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腫瘤細胞鑒別新方法
腫瘤細胞的固定化作用通常是通過一種兼容的溶膠-凝膠封裝法來實現的,其能夠產生孔隙性高的多孔基質來滿足細胞足夠的營養需求、氣體擴散并且滿足細胞的代謝需求,但如果孔隙過小就會抑制細胞運動和增殖。據研究者介紹,對模型的驗證加速了腫瘤休眠學研究領域的發展,我們都知道癌癥的特殊轉移通常是由休眠細胞所引發的,而科學家們很難對休眠的癌細胞進行靶向作用,如果他們能夠分離并且研究這些休眠細胞,就能夠開發出特殊方法有效將其殺滅。在癌癥發展的過程中,休眠的癌細胞通常會經歷靜止階段,在該階段癌細胞并...
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轉化細胞配置注意重點
轉化細胞是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養基可根據實際需要,添加一些自身無法合成的化合物,即生長因子。有些微生物,如自養型微生物,不需要碳源,所以上述物質只具有一般性。雖然不同培養基配置的細節會有些不一樣,但是重點步驟還是相同的。培養基配置要點:1)確認培養基的成分,并稱量;2)加入各個成分的順序;3)準確調pH;4)適當的滅菌方法;5)轉化細胞無菌條件下分裝。Sangu...
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ATCC細胞三種類型的信號
ATCC細胞是一個動態體系,每時每刻都有大量的生化反應在進行。對于信號傳導來說,這個系統充斥著高水平的噪音。那么細胞是怎樣在這種條件下準確傳遞化學信號的呢?細胞對外界化學信號的應答,取決于自己的生理狀態。但細胞生理狀態存在顯著的波動,比如說細胞中各種蛋白的含量會出現高達25%的變動。“這是相當大的噪音”。為了了解細胞如何編碼化學信號的水平,將顯微成像與信息學理論結合了起來。他們研究了三個不同的化學通訊系統,鈣離子、ERK和NF-κB。這三種類型的信號傳導分別持續幾分鐘、一小時...
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ATCC細胞信號傳導的基本步驟
人體ATCC細胞之間的信息轉導可通過相鄰細胞的直接接觸來實現,但更重要的也是更為普遍的則是通過細胞分泌各種化學物質來調節自身和其他細胞的代謝和功能,因此在人體中,信息傳導通路通常是由分泌釋放信息物質的特定細胞、信息物質(包含細胞間與細胞內的信息物質和運載體、運輸路徑等)以及靶細胞(包含特異受體等)等構成。細胞信號傳導通路-2.信號轉導的基本步驟信號轉導通常包括以下步驟:特定的細胞釋放信息物質→信息物質經擴散或血循環到達靶細胞→與靶細胞的受體特異性結合→受體對信號進行轉換并啟動...
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轉化細胞周期概述
轉化細胞周期指由細胞分裂結束到下一次細胞分裂結束所經歷的過程,所需的時間叫細胞周期時間。可分為四個階段:①G1期(gap1),指從有絲分裂完成到期DNA復制之前的間隙時間;②S期(synthesisphase),指DNA復制的時期,只有在這一時期H3-TDR才能摻入新合成的DNA中;③G2期(gap2),指DNA復制完成到有絲分裂開始之前的一段時間;④M期又稱D期(mitosisordivision),細胞分裂開始到結束。細胞周期(cellcycle)是指細胞從前一次分裂結束...
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自體多能性干細胞修復血管的技術取得巨大進展
干細胞專家們開發出了能夠使血管形成長期的自我修復功能的技術。這一技術能夠為治療外周血管疾病奠定基礎。由Young-supYoon博士領導的研究者們開發出了一類利用自體多能性干細胞分化血管上皮細胞的手段,分化出的上皮細胞用支持性膠包裹,之后移植進入小鼠受損的血管中。這部分細胞能夠形成新的血管組織,存在時間超過10個月。此前一些研究者們曾做過相似的嘗試,但植入的細胞存在時間不會超過幾天到一周。當細胞移植進入體內之后,大部分會快速死亡,而當把這些細胞用膠包裹起來之后,則能夠得到很好...
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腫瘤細胞“微環境”抵御白血病惡化的工作原理
通過阻斷急性腫瘤細胞母細胞白血病(T-ALL)核心中T細胞表面的特殊蛋白受體的活性,從而成功地抑制并且逆轉了T-ALL的特殊癌性白細胞的生長。對小鼠和人類細胞進行試驗,研究者發現,阻斷名為CXCR4的特殊分子就可以在兩周內抑制骨髓和脾臟組織中疾病的進展,而CXCR4是一種特殊的歸巢受體蛋白分子,其可以幫助T細胞成熟并且將血細胞吸引到骨髓中;而該實驗可以使得實驗活老鼠機體中的白細胞至少超過30周時間免于癌變,進一步對發展為T-ALL的小鼠進行研究發現,剔除CXCR4所結合的蛋白...
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干細胞可作為抗腫瘤靶標的新成分
干細胞在研究中運用了多種實驗方法,涵蓋了生物化學、分子生物學、細胞生物學的技術。同時和其他的實驗室也有非常活躍的合作,合作領域涉及線蟲、小鼠等模式系統的遺傳學,包括X-射線結晶學、電子顯微鏡的結構生物學,以及高通量篩選化合物庫及化學合成的化學生物學。研究組計劃在NIBS建立這些技術并使這些技術能為所有NIBS的實驗室利用。在NIBS的實驗室將繼續研究細胞凋亡的生化途徑。同時將研究RNA干擾(RNAi)的生化機制及其在哺乳動物系統中的生物學功能PTEN是一種重要的具有磷酸酶活性...
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