蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶(hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Phosphodiesterase 9A (PDE9A)

High affinity cGMP-specific 3',5'-cyclic phosphodiesterase 9A

型號(hào)：GOY-01D820

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì), 高爾基體

預(yù)測(cè)分子量：34.2kDa

實(shí)際分子量：35kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Ile290~Arg549 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：5.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品名稱(chēng)：S轉(zhuǎn)移酶μ1(GSTM1)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱(chēng)：Recombinant Glutathione S Transferase Mu 1 (GSTM1)

產(chǎn)品名稱(chēng)：肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白  物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)  英文名稱(chēng)：Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)

產(chǎn)品名稱(chēng)：表皮轉(zhuǎn)酶(TGM3)重組蛋白  物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)  英文名稱(chēng)：Recombinant Transglutaminase 3, Epidermal (TGM3)

產(chǎn)品名稱(chēng)：肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白  物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)  英文名稱(chēng)：Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)

產(chǎn)品名稱(chēng)：蛋白激酶Cβ1(PKCb1)重組蛋白  物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)  英文名稱(chēng)：Recombinant Protein Kinase C Beta 1 (PKCb1)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

基質(zhì)金屬3抗體 MMP-3

基質(zhì)金屬2抗體 MMP2

基質(zhì)金屬-7抗體 MMP-7

基質(zhì)金屬-9抗體 MMP9

髓鞘少樹(shù)突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體 MOG

多藥耐藥相關(guān)蛋白1抗體 MRP1

多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體 MRP2

多藥耐藥相關(guān)蛋白3抗體 MRP3

錯(cuò)配修復(fù)蛋白2抗體 MSH2

5甲基胞嘧啶抗體 5 MethylCytosine

線(xiàn)粒體核糖體蛋白L28抗體 MrpL28

T淋巴細(xì)胞分化蛋白MAL2抗體 MAL2

磷酸二酯酶9A(PDE9A)重組蛋白人Deoxycholic acidsodium salt 脫氧鈉 (進(jìn)口)25g瓶

Parishin 派立辛62499-28-920mg

SYBR Green I(10000×)50ul瓶

Ginsenoside Rg3 14197-60-520mg

蓋玻片 12×12mm100片盒

人原-HRP0.1ml支

細(xì)胞鏟子1.9cm個(gè)

B-27 Serum-Free Supplement (50×)10ml支

Cinobufagin 華酥毒基470-37-120mg

Low density lipoprotein，human 低密度脂蛋白2mg瓶

Phytic acid 植酸83-86-320mg

JM109受體菌1ml支