蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：基質金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白犬

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)

SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1

型號：GOY-01D63

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：-

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)  產品名稱：堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)  產品名稱：堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

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英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal (NOS1)  產品名稱：神經型一氧化氮合酶(NOS1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Nitric Oxide Synthase 2, Inducible (NOS2)  產品名稱：誘導型一氧化氮合酶(NOS2)重組蛋白物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

載脂蛋白A1結合蛋白抗體抗體 APOA1BP/AI-BP

脂肪細胞膜相關蛋白抗體 APMAP

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復合物1抗體 APOBEC1

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復合物2抗體 APOBEC2

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復合物3B抗體 APOBEC3B

載脂蛋白B-mRNA編輯酶復合物3C抗體 APOBEC3C

載脂蛋白C1抗體 Apolipoprotein CI/APOC1

載脂蛋白C2抗體 Apolipoprotein CII/APOC2

載脂蛋白L4抗體 APOL4

載脂蛋白L5抗體 APOL5

載脂蛋白L1抗體 APOL1

載脂蛋白M抗體 ApoM

基質金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白犬異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小單孢菌 Micromonospora sp.地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii鼠桿菌 Lactobacillus murinus

人腺細胞厚垣孢普可尼亞菌 Pochonia chlamydosporia

A-375(人惡性黑色素瘤細胞)PBS

中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis

黑木耳 Auricularia auricula鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

核盤菌石狀正青霉 Eupenicillium lapidosum

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum帚石南棒桿菌 Corynebacterium callunae

蘇云金芽胞桿菌莫里遜亞種 Bacillus thuringiensis subsp. Morrisoni大豆慢生根瘤菌

SY5Y/神經母細胞瘤細胞小鼠膀胱上皮細胞培養基

KM3, 人多發性骨髓瘤細胞HEC-1-B(人子宮內膜腺細胞)

狀絲孢酵母 Trichosporon capitatum糖細黃鏈霉菌 Streptomyces microflavus