蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：基質金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白牛

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)

SL1; STMY; STMY1; STR1; Progelatinase; Stromelysin 1; Transin-1

型號：GOY-01D62

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌, 細胞外基質

預測分子量：56.3kDa

實際分子量：56kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Tyr18~Cys477 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：5.3

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Pyruvate dehydrogenase alpha 1 (PDHA1)  產品名稱：丙酮酸脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Pyruvate dehydrogenase alpha 1 (PDHA1)  產品名稱：丙酮酸脫氫酶α(PDHA1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Chicken (Gallus，雞)

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Topoisomerase II (TOP2)  產品名稱：拓撲異構酶Ⅱ(TOP2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)  產品名稱：堿性鞘磷脂磷酸二酯酶(Alk-Smase)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

粘合連接相關蛋白1抗體 AJAP1

神經細胞分化相關蛋白AHNAK抗體 AHNAK

去整合素樣金屬13抗體 ADAM13

聚集蛋白抗體 Agrin

轉錄因子AP2α+β抗體 AP2 alpha + beta

磷酸化腺瘤樣息肉抗體 phospho-APC (Ser2054)

磷酸化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體 phospho-APC1 (Ser688)

細胞周期后期促進蛋白亞基10抗體 APC10

腺瘤性結腸息肉病蛋白2抗體 APC2

磷酸化細胞分裂周期蛋白16抗體 phospho-APC6 (Thr580)

細胞周期后期促進蛋白亞基11抗體 APC11

DNA修復酶相互作用蛋白抗體 APLF

基質金屬蛋白酶3(MMP3)重組蛋白牛許旺酵母 Schwanniomyces occidentalis植物桿菌 Lactobacillus plantarum

人成纖維瘤細胞玉蜀黍蠕孢 Helminthosporium maydis

奈正青霉 Eupenicillium sinaicum人支氣管平滑肌細胞培養基

RM1(大鼠肌肉成纖維樣細胞)小鼠卵巢顆粒細胞培養基

枝芽胞菌 Virgibacillus sp.桿菌屬 Lactobacillus sp.

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium frediiIII型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)

USMC(大鼠血管平滑肌細胞)大鼠食管平滑肌細胞培養基

人心房肌細胞培養基凝結芽孢桿菌 Bacillus coagulans

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti香菇 Lentinula edodes

葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarumM14(人黑色素瘤細胞)

人慢性骨髓性白血病細胞無色桿菌屬 Leucobacter sp.

佛羅里達側耳 Pleurotus florida異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala

田菁根瘤菌 Azorhizobium canlinodans293FT(人胚腎細胞)