蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：羧酸酯酶5A(CES5A)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Carboxylesterase 5A (CES5A)

CES7; CES4C1; CES5; CAUXIN; Carboxylesterase-like urinary excreted protein homolog

型號：GOY-01D32

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預測分子量：51.7kDa

實際分子量：54kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：His383~Phe570 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：5.9

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Cathepsin K (CTSK)  產品名稱：組織K(CTSK)重組蛋白物種：Sus scrofa; Porcine (Pig，豬)

英文名稱：Recombinant Cathepsin K (CTSK)  產品名稱：組織K(CTSK)重組蛋白

英文名稱：Recombinant Cathepsin K (CTSK)  產品名稱：組織K(CTSK)重組蛋白物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)

英文名稱：Recombinant Cathepsin K (CTSK)  產品名稱：組織K(CTSK)重組蛋白物種：Rhesus monkey (Simian，恒河猴)

英文名稱：Recombinant Phospholipase C Gamma 1 (PLCg1)  產品名稱：磷酯酶Cγ1(PLCg1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Glutamate Dehydrogenase 1 (GLUD1)  產品名稱：脫氫酶(GLUD1)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

β淀粉樣前體蛋白結合蛋白1抗體（X11α） APBA1

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 phospho-c-Abl (Tyr70)

載脂蛋白E抗體 Apolipoprotein E

甲胎蛋白AFP抗體 AFP

陰離子交換蛋白2抗體 AE2

鐵調節蛋白1抗體 Aconitase 1

三酶家族蛋白3A抗體 ATAD3A

載脂蛋白J抗體 APOJ

二核糖基轉移酶4抗體 ART4

AKIRIN2蛋白抗體 AKIRIN2

載脂蛋白H抗體 APOH

ADP核糖基化樣因子8B抗體 ARL8B

羧酸酯酶5A(CES5A)重組蛋白人東京根霉 Rhizopus tonkinensis蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

大腸桿菌 Escherichia coli薛瓦酵母 Saccharomyces chevalieri

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis膠韌革菌 Gloeostereum incarnatum

大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞（未分化）苜蓿中華根瘤菌

淺天藍鏈霉菌 Streptomyces coerulescens大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilusMRC5/成纖維細胞

SMC-1(人胸膜瘤細胞)酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

NCI-H838(人非小細胞肺細胞)人皮膚肥大細胞培養基

苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

DLD-1(人結腸腺細胞)中華根霉

蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis泛酸枝芽胞桿菌 Virgibacillus pantothenticus

洛格酵母 Saccharomyces logos小鼠白血病細胞G-CSF依賴性

小鼠膀胱上皮細胞培養基透質酸酶(含100mL酶解緩沖液)