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牛細小病毒PCR檢測試劑盒實驗操作流程
牛細小病毒PCR檢測試劑盒實驗操作流程:1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。4.試劑盒所有試劑在使用前...
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人髓磷脂堿性蛋白ELISA試劑盒實驗樣品活化方法
人髓磷脂堿性蛋白ELISA試劑盒樣品活化方法:生物樣品中的通常以無活性的形式存在,在檢測指標活性前必須進行活化處理。活化方法如下:血清、血漿:280μL標準品&樣品稀釋液中加入40μL樣品,混勻,加入40μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40μL活化試劑2,混勻后立即檢測。注意:樣品被稀釋了10倍!細胞培養上清:20μL標準品&樣品稀釋液中加入100μL樣品,混勻,加入40μL活化試劑1,室溫孵育10分鐘。再加入40μL活化試劑2,混勻后立即檢測。注意:樣品被稀釋了2倍...
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犬膽囊收縮素elisa檢測試劑盒實驗操作注意事項
犬膽囊收縮素elisa檢測試劑盒注意事項1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定...
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人FAS配體elisa檢測試劑盒使用操作技巧
人FAS配體elisa檢測試劑盒使用操作技巧1.操作前應對試驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗刷的次數等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應筆直參加標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次第要與說明書一起,否則可導致效果過錯,試驗重復性差。3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗刷次數不要逾越說明書舉薦的洗刷...
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人腦紅蛋白ELISA免費代測試劑盒血清保存的注意事項
人腦紅蛋白(NGB)ELISA免費代測試劑盒血清保存的注意事項以下幾點:(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂.(2)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少...
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達氏疏螺旋體PCR檢測試劑盒檢測方法
達氏疏螺旋體PCR檢測試劑盒檢測方法:?1.Ⅰ法:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。定量PCR擴增熒光曲線圖PCR產物熔解曲線圖2.TaqMan探針法:探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統...
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猴子膠原酶IELISA檢測試劑盒實驗禁忌
猴子膠原酶IELISA檢測試劑盒實驗禁忌:1、濃洗滌液可能會有結晶析出,ELISA試劑盒稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。2、如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(×5×n)。3、各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其正確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內,如標本數目多,推薦使用排槍加樣。4、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5、嚴格按照說明書的操縱進行,ELI...
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ELISA試劑盒背景深,全部呈有色原因
ELISA試劑盒背景深,全部呈有色(通常的Elisa背景值OD1洗滌不充分,洗后未拍干,樣品中其它成分殘留或酶標記物殘留洗液準確配制;充分洗滌,靜置15秒,*拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應棄去不用,不要反復使用,否則易造成污染。2底物污染,未避光保存,出現顏色棄去底物,重新配置3樣品稀釋液污染棄去稀釋液,重新配置4吸頭重復使用,未洗凈或消毒不*吸頭盡可能一次性使用5不正確的孵育時間,溫度(尤其是底物孵育的時間)為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。*按照說明書...
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小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)檢測試劑盒檢測方法的局限性
小鼠磷酸化氨基末端蛋白激酶(P-JNK)檢測試劑盒檢測方法的局限性:①樣本檢測結果不樣本收集、處理、運送以及保存質量有關;②樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現假陽性結果;③陽性對照、擴增產物泄漏,會導致假陽性結果;④病原體在流行過程中基因突變、重組,會導致假陰性結果;⑤不同的提取方法存在提取效率差異,會導致假陰性結果;⑥試劑運輸,保存不當或試劑配制不準確引起的試劑檢測效能下降,出現假陰性或定量檢測不準確的結果樣本采集、存放及運輸:1、費用樣本采集:各類型樣本按照常規方法...
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豬TGFβ1elisa檢測試劑盒實驗中給檢測樣本加樣的步驟詳解
豬TGFβ1elisa檢測試劑盒實驗中給檢測樣本加樣的步驟詳解:1.細胞上清:前處理必須是細胞離心去除,每孔直接加100p1即可。如果濃度太高需稀釋時,用標準品稀釋液直接稀釋。2.腦脊液:前處理必須是細胞離心去除,每孔直接加100W1即可。如果濃度太高需稀釋時,用標準品稀釋液直接稀釋。3.血清血漿:加入50u山樣本分析緩沖液后加50u標本如稀釋量大,請將樣本與樣本分析緩神液等量加入,不足部分用標準品稀釋液補充至100u①血清標本應是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液②血...
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人絨毛膜促性腺激素βelisa檢測試劑盒檢測未知抗體的間接法
人絨毛膜促性腺激素βelisa檢測試劑盒檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~...
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脲原體通用PCR檢測試劑盒樣品處理及要求
脲原體通用PCR檢測試劑盒樣品處理及要求:1.血清:將收集于血清分高管的全血標本在室溫放置2小時4C過夜,然后10009高心20分鐘,取上)清可或將上清置于-20C或80℃保存,但應免反復東融2.血:用EDTA成肝素作為抗疑劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8c1000×9離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20C或-80℃保存,但應造兔反復陳3組織勻:用預令的PBS(0.01M,pH=7.4)中洗組織,去除殘留血液(勻家中裂解的紅細會影響測量結果),稱重...
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