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產品屬性：

英文名稱：Eukaryotic Aspartate Aminotransferase (AST)

cCAT; AAT; ASAT; SGOT; GOT1; Cysteine transaminase, cytoplasmic; Transaminase A; Aspartate Transaminase 1,Cytoplasmic; Glutamic-Oxaloacetic Transaminase 1,Soluble

型號：GOY-01D3031

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

肝膽病學

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：真核表達

宿主Yeast

內毒素水平：<1.0EU per 1ug (determined by the LAL method)

亞細胞定位：：細胞質

預測分子量：47.5kDa

實際分子量：48kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ala2~Gln413 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液，（pH8.0,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 5% Trehalose and Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：6.6

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

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竹紅菌乙素;Hypocrellin B 規格： 20mg 訂購|咨詢

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紫莖女貞苷D ;Ligupurpuros 規格： 10mg 訂購|咨詢

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 QGY-7701(人肝細胞)5×106cells/瓶×2

紫莖女貞苷B;Ligupurpurosi 規格： 10mg 訂購|咨詢

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1次 96孔板質粒DNAout（離心法） 96 Microwell Plate Plasmid DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)

人蘭尼堿受體2(RYR2)免疫試劑盒

2 ug PT2-Puro PT2-Puro 低溫運輸，-20℃保存

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山羊脂多糖/內毒素(LPS)免疫試劑盒現貨供應