產品屬性：

產品名稱：糖原磷酸化酶L(PYGL)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant Glycogen Phosphorylase, Liver (PYGL)

GPLL; GPBB; Hers Disease; Glycogen Storage Disease Type VI

型號：GOY-01D347

酶與激酶

代謝通路

內分泌學

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：-

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

C型凝集素結構域家族5成員A抗體 CLEC5A

半胱胺酸蛋白9-p10抗體 caspase-9 p10

周期素依賴激酶1抗體 CDK1

細胞衰老抑制基因抗體 RSL1D1

環腺苷酸應答元件結合蛋白抗體 CREB-1

酪蛋白激酶1γ1抗體 CSNK1G1

21號染色體開放閱讀框88抗體 C21orf88

21號染色體開放閱讀框54抗體 C21orf54

周期素依賴性激酶9抗體 Cyclin T1

細胞分裂周期蛋白6抗體 Cdc6

細胞周期檢測點激酶2抗體 CHK2

細胞周期調控因子34 CDC34

糖原磷酸化酶L(PYGL)重組蛋白小鼠小鼠直腸平滑肌細胞培養基UACC-812(人腺導管瘤細胞)

桿菌屬 Lactobacillus sp.豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

串珠鐮孢 Fusarium moniliforme印第安那亞種 Bacillus thuringiensis subsp. indiana

熱帶假絲酵母 Candida tropicalisSV-HUC-1(人膀胱上皮永生化細胞)

桿菌 Lactobacillus sp.

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

弗氏鏈霉菌 Streptomyces fradiae

戊糖片球菌 Pediococcus pentosaceusMN-c, 小鼠皮質神經元

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

T24, 人膀胱細胞人前列腺成纖維細胞培養基

丁酸梭菌 Clostridium butylicumEBV-轉化人淋巴細胞

香菇屬 Lentinula sp.

松杉暗孔菌 Phaeolus schweinitzii