蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)

CA-II; CAII; Car2; CAC; Carbonate dehydratase II; Carbonic anhydrase C

型號：GOY-01D329

酶與激酶

腫瘤免疫

骨骼代謝

物種：Chicken (Gallus，雞)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：30.5kDa

實(shí)際分子量：28kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Met1~Gln260 (Accession # P07630) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Topoisomerase I (產(chǎn)品名稱：拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Aminoadipate Semialdehyde Phosphopantetheinyl Transferase (AASDHPPT)  產(chǎn)品名稱：氨基乙二酸半醛磷酸泛酰巰基乙胺基轉(zhuǎn)移酶(AASDHPPT)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Adenosine Kinase (ADK)  產(chǎn)品名稱：腺苷激酶(ADK)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Aminolevulinate Delta Dehydratase (ALAD)  產(chǎn)品名稱：氨乙酰丙酸δ脫水酶(ALAD)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Butyrylcholinesterase (BCHE)  產(chǎn)品名稱：丁酰酯酶(BCHE)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Calpain 2 (CAPN2)  產(chǎn)品名稱：鈣2(CAPN2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

周期素B2抗體 Cyclin B2

細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體 Cryopyrin

鈣腔蛋白 Calumenin

6號染色體開放閱讀框222抗體 C6orf222

熱休克蛋白58抗體 Cornulin

 P450 17A1抗體 Cytochrome P450 17A1

膜蛋白CLDND1抗體 CLDND1

二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白1抗體 CRMP1

CD98重鏈抗原抗體 CD98

鈣抑制蛋白抗體 Calpastatin

氯單克隆抗體 Chloramphenicol

cGMP依賴性蛋白激酶1抗體 cGKI

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白雞293A (人胚腎細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

尖孢鐮刀菌棉花?；?/span> Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum香菇 Lentinula edodes

大鼠卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基淡紫擬青霉 Paecilomyces lilacinus

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum小鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosusCa Ski, 人宮頸細(xì)胞

人胎盤絨毛膜細(xì)胞培養(yǎng)基嗜熱棲熱菌 Thermus thermophilus

異常漢遜酵母 Hansenula anomala毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

小鼠黑色素瘤細(xì)胞檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum

酒假絲酵母 Candida kefyr金色產(chǎn)色鏈霉菌 Streptomyces aureochromogenes

RWPE1(人前列腺上皮細(xì)胞)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

委內(nèi)瑞拉鏈霉菌 Streptomyces venezuelae人肺細(xì)胞

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae人前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

MDA-MB-157(人腺細(xì)胞)葡萄球菌屬 Staphylococcus sp