產品屬性：

英文名稱：Recombinant Glucokinase (GCK)

GK; GLK; HHF3; HK4; HKIV; HXKP; MODY2; Hexokinase-D; Hexokinase 4; Maturity Onset Diabetes Of The Young 2

型號：GOY-01D280

酶與激酶

代謝通路

內分泌學

營養代謝

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞核, 細胞質

預測分子量：29.3kDa

實際分子量：29kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Asp3~Val226 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：4.5

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

2號染色體開放閱讀框57抗體 C2orf57

2號染色體開放閱讀框55抗體 C2orf55

2號染色體開放閱讀框29抗體 C2orf29

3號染色體開放閱讀框21抗體 C3orf21

1號染色體開放閱讀框74抗體 C1ORF74

補體C1q和腫瘤壞死因子相關蛋白10抗體 C1QTNF10

1號染色體開放閱讀框93抗體 C1orf93

1號染色體開放閱讀框94抗體 C1orf94

1號染色體開放閱讀框41抗體 C1orf41

1號染色體開放閱讀框144抗體 C1orf144

1號染色體開放閱讀框96抗體 C1orf96

4號染色體開放閱讀框3抗體 C4orf3

葡萄糖激酶(GCK)重組蛋白人泡盛曲霉 Aspergillus awamori小鼠白血病細胞

HCCLM3(人高轉移肝細胞)RK1(大鼠腎細胞)

豐加鏈霉菌灰白亞種 Streptomyces toyocaensis subsp. incanus泡盛曲霉 Aspergillus awamori

大鼠氣管和支氣管上皮細胞培養基間型酒香酵母 Brettanomyces intermedius

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Hepa 1-6, 小鼠肝細胞NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞)

馬克斯克魯維酵母 Kluyceromyces marxianus根瘤菌

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis大鼠腎上皮細胞培養基

考馬斯亮藍G-250人少突膠質細胞

哈茨木霉熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

人急性淋巴母細胞白血病細胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

瓦克青霉 Penicillium waksmanii大鼠海馬神經元細胞培養基

成纖維細胞里氏木霉 Trichoderma reesei