蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：內皮素轉化酶1(ECE1)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)

酶與激酶

型號：GOY-01D211

心腦血管

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：32.8kDa

實際分子量：30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Leu469~Glu721 (Accession # P42892) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Indoleamine-2,3-Dioxygenase 2 (IDO2)  產品名稱：吲哚胺2,3-雙加氧酶2(IDO2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1)  產品名稱：S轉移酶α1(GSTa1)重組蛋白物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)  產品名稱：基質金屬12(MMP12)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Furin (FUR)  產品名稱：弗林(FUR)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Lysine Specific Demethylase 4C (KDM4C)  產品名稱：賴特異性去甲基化酶4C(KDM4C)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 2 (CDK2)  產品名稱：周期素依賴性激酶2(CDK2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

鈣粘附蛋白-11抗體 CDH11

卷曲螺旋結構域蛋白158抗體 CCDC158

核仁蛋白C23抗體 C23

皮膚相互作用蛋白2抗體 CASKIN2

1號染色體開放閱讀框149抗體 C1orf149

碳水化合物激酶結構域蛋白質抗體 CARKD

尾側型同源轉錄因子1抗體 CDX1

補體C1qTNF8鏈多肽抗體 C1QTNF8

磷酸化胞漿型磷脂酶A2抗體 phospho-CPLA2 (Ser505)

9號染色體開放閱讀框46抗體 C9ORF46

21號染色體開放閱讀框62抗體 C21ORF62

20號染色體開放閱讀框103抗體 C20orf103

內皮素轉化酶1(ECE1)重組蛋白人尖孢鐮刀菌棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis

涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis猴菌

人腺細胞豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

F9(小鼠畸胎瘤細胞)cECL Western Blot Kit/低背景化學發光檢測試劑盒

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

李色鏈霉菌可溶變種 Streptomyces prunicolor var. solubilis靈芝 Ganoderma lucidium

小鼠肺微血管內皮細胞培養基大鼠神經小膠質細胞培養基

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum植物桿菌 Lactobacillus plantarum

蘇云金芽胞桿菌亞毒亞種 Bacillus thuringiensis subsp. subtoxicus根瘤菌 Rhizobium sp.

One StepWestern Kit AP(Mouse)/一步法快速WB(AP)試劑盒(鼠)人肺腺細胞（胸膜滲出液）

杰丁畢赤酵母 Pichia jadinii人肝內膽管上皮細胞培養基

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus皮狀絲孢酵母 Trichosporon cutaneum

短短芽胞桿菌 Brevibacillus brevisNCI-H226(人肺鱗細胞)