產品屬性：

產品名稱：蛋白激酶Cδ(PKCd)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Delta (PKCd)

PKC-D; MAY1; PRKCD; SDK1; NPKC-Delta; Tyrosine-protein kinase PRKCD; Sphingosine-dependent protein kinase-1

型號：GOY-01D197

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞膜, 細胞核, 細胞質

預測分子量：43.9kDa

實際分子量：44kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Asn328~Ile674 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：5.6

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

膠原樣蛋白抗體 COL20A1

原癌基因CD39樣蛋白4抗體 CD39L4

腫瘤易感性候選基因5抗體 CASC5

鈣調蛋白激酶激酶β抗體 CAMKK2

中心體肌動蛋白γ1/增強型PI3K蛋白抗體 Centaurin gamma 1

細胞分裂周期相關蛋白JPO2抗體 CDCA7L

半胱胺酸-2抗體 Caspase 2

7號染色體開放閱讀框63抗體 C7orf63

膠原三股螺旋重復蛋白1抗體 CTHRC1

20號染色體開放閱讀框72抗體 c20orf72

CD2結合蛋白3抗體 CD2BP3

2號染色體開放閱讀框6抗體 C2orf6

蛋白激酶Cδ(PKCd)重組蛋白小鼠BPH-1, 人前列腺增生細胞人肺成纖維細胞

楊氏檸檬酸桿菌 Citrobacter youngae人淋巴成纖維細胞培養基

JEC, 人子宮內膜腺細胞系破裂正青霉 Eupenicillium fractum

貝葉多孔菌根瘤菌

人皮膚肥大細胞培養基貓腎細胞

放射形土壤桿菌 Agrobacterium radiobacter宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae抗生鏈霉菌 Streptomyces antibioticus

芽胞桿菌 Bacillus sp.CaCO2全細胞裂解液

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

大腸桿菌 Escherichia coli毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

MuM-2B(人眼脈絡黑色素瘤細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

根瘤菌香菇 Lentinula edodes