產品屬性：

產品名稱：鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Calcium Independent (iPLA2)

PLA2G6; CaI-PLA2; GVI; INAD1; PNPLA9; Ca2+ Independent PLA2; 85 kDa Calcium-Independent Phospholipase A2; Phospholipase A2,group VI(Cytosolic,Calcium-Independent)

型號：GOY-01D192

酶與激酶

代謝通路

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：染色體

預測分子量：28.3kDa

實際分子量：32kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Leu481~Val702 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：9.9

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

中心體蛋白55kDa抗體 CEP55

卷曲螺旋結構域蛋白11抗體 CCDC11

富含半與表皮生長因子樣蛋白2抗體 AVSD2

細胞骨架相關蛋白2/腫瘤和微管相關蛋白抗體 CKAP2

染色質修飾蛋白4B(4C)抗體 CHMP4B+CHMP4C

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 phospho-c-Abl (Tyr412)

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 phospho-c-Abl (Tyr226)

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 phospho-c-Abl (Tyr185)

柯薩奇病毒蛋白受體B抗體 Coxsackie Adenovirus Receptor

腫瘤抑制因子FBW7抗體 CDC4

酪蛋白激酶1γ2抗體 CSNK1G2

細胞粘附分子4抗體 Cell adhesion molecule 4

鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)重組蛋白大鼠炭黑曲霉 Aspergillus carbonariusPA319(人大腸細胞)

中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis

巴蘑菇 Agaricus bisporus鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum節桿菌 Arthrobacter sp.

TT(人甲狀腺導管細胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae葡萄汁酵母 Saccharomyces uvarum

蘇木素伊紅(HE)染色試劑盒大豆慢生根瘤菌

U251人膠質瘤細胞HCCC-9810(人肝內膽管細胞)

土曲霉 Aspergillus terreus瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

苜蓿中華根瘤菌馬杜拉放線菌 Actinomadura Sp.

大鼠小鼠雜合神經膠質瘤細胞噬夏孢歐文氏菌 Pantoea ananatis

小鼠骨髓間充質干細胞（BMSCs）休哈塔假絲酵母 Candida shehatae

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum膠韌革菌