蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產(chǎn)品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白兔

英文名稱：Recombinant Cathepsin K (CTSK)

CTS-K; CTS02; CTSO; CTSO1; CTSO2; PKND; PYCD; Pycnodysostosis; Cathepsin O; Cathepsin X

型號：GOY-01D159

酶與激酶

感染免疫

骨骼代謝

物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞膜, 分泌, 溶酶體

預測分子量：27.3kDa

實際分子量：31kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Thr115~Met329 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：9.0

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Protoporphyrinogen Oxidase (PPOX)  產(chǎn)品名稱：原卟啉原氧化酶(PPOX)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Dual Specificity Phosphatase 5 (DUSP5)  產(chǎn)品名稱：雙特異性磷酸酶5(DUSP5)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Dual Specificity Phosphatase 5 (DUSP5)  產(chǎn)品名稱：雙特異性磷酸酶5(DUSP5)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Dual Specificity Phosphatase 6 (DUSP6)  產(chǎn)品名稱：雙特異性磷酸酶6(DUSP6)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Dual Specificity Phosphatase 9 (DUSP9)  產(chǎn)品名稱：雙特異性磷酸酶9(DUSP9)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Deiodinase, Iodothyronine, Type I (DIO1)  產(chǎn)品名稱：碘甲腺原脫碘酶Ⅰ(DIO1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

細胞表面趨化因子受體1抗體 CXCR1

間隙連接蛋白45抗體 Connexin-45

細胞色素P450單氧化酶抗體 CYP450

抗體 Cytochrome C

細胞角蛋白1抗體 CK1

巨細胞病毒PP65/CMV低基質磷脂蛋白抗體 Cytomegalovirus pp65

周期素C抗體 Cyclin C

周期素B1抗體 Cyclin B1

周期素D1抗體 Cyclin D1

周期素D2抗體 Cyclin D2

細胞球蛋白抗體 Cytoglobin

周期素E抗體 Cyclin E

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白兔植物桿菌 Lactobacillus plantarum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

香菇 Lentinula edodes微小鏈霉菌 Streptomyces parvullus

圓酵母菌屬 Torula sp.HMy2.CIR(人B淋巴母細胞)

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna粘紅酵母 Rhodotorula glutinis

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

Lncap clone FGC(人前列腺細胞)大鼠頜下腺上皮細胞培養(yǎng)基

苜蓿中華根瘤菌屎腸球菌 Enterococcus faecium

RSC, 大鼠雪旺細胞天藍色鏈霉菌 Streptomyces coelicolor

異常漢遜酵母異常變種 Hansenula anomala var. anomala人神經(jīng)元細胞培養(yǎng)基

HEC-1-A(人子宮內膜腺細胞)大鼠冠狀動脈內皮細胞培養(yǎng)基

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes酸片球菌 Pediococcus acidilactici

人前列腺平滑肌細胞培養(yǎng)基黑曲霉 Aspergillus niger

中分子量單一蛋白Marker（27 kD）釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae