蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Eta (PKCh)

PRKCH; PRKC-H; PKC-L; PRKCL; NPKC-Eta

型號：GOY-01D146

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞質

預測分子量：30.9kDa

實際分子量：30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Phe355~Phe614 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：5.6

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Homogentisate-1,2-Dioxygenase (HGD)  產品名稱：尿黑酸1,2-雙加氧酶(HGD)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase (HPD)  產品名稱：4-羥基酸雙加氧酶(HPD)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide I (P4Ha1)  產品名稱：-4-羥化酶α多肽Ⅰ(P4Ha1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide II (P4Ha2)  產品名稱：脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅱ(P4Ha2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide III (P4Ha3)  產品名稱：脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅲ(P4Ha3)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Muscle, Skeletal, Receptor Tyrosine Kinase (MUSK)  產品名稱：骨骼肌特異性受體激酶(MUSK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

細胞連接相關蛋白1抗體 CLASP1

冷誘導RNA結合蛋白抗體 CIRBP

細胞連接相關蛋白2抗體 CLASP2

磷酸化周期素依賴性激酶5抗體 phospho-CDK5(Tyr15)

異戊烯半羧基甲基轉移酶抗體 ICMT

核苷酸交換因子CLLD7抗體 CLLD7

趨化素樣因子超家族成員4抗體 CKLFH4

趨化素樣因子超家族成員7抗體 CKLFSF7

卷曲螺旋結構域蛋白64B抗體 CCDC64B

組蛋白H3-K9甲基轉移酶抗體 CLLD8

趨化素樣因子超家族成員5抗體 CKLFH5

趨化素樣因子超家族成員6抗體 CKLFH6

蛋白激酶Cη(PKCh)重組蛋白人A172(人腦膠質瘤細胞)B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細胞)

植物桿菌 Lactobacillus plantarum根瘤菌

疣孢漆斑菌 Myrothecium verrucaria大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

MA, 小鼠星形膠質細胞非洲綠猴腎細胞

黑曲霉 Aspergillus nigerPLC/PRF/5(人肝亞力山大細胞)

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae植物桿菌 Lactobacillus plantarum

不產色鏈霉菌 Streptomyces achromogenes黑曲霉 Aspergillus niger

日本根霉 Rhizopus japonicus多孢木霉

易脆毛霉 Mucor fragilis彎曲假單胞菌 Pseudomonas flectens

大鼠神經膠質細胞培養基小鼠黑色素瘤細胞

宇佐美曲霉 Aspergillus usamiiMM, 小鼠小膠質細胞

泡盛曲霉 Aspergillus awamori大鼠卵巢成纖維細胞培養基

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis