產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白小鼠

英文名稱：Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)

CK-MM; CKMM; CK3; CK-M; MM-CK; M-CK; Creatine kinase M-type, N-terminally processed

型號：GOY-01D85

酶與激酶

心腦血管

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：41.8kDa

實(shí)際分子量：45kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Lys11~Leu367 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Proteinase 3 (PR3)  產(chǎn)品名稱：3(PR3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Proteinase 3 (PR3)  產(chǎn)品名稱：3(PR3)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Tyrosine Hydroxylase (TH)  產(chǎn)品名稱：羥化酶(TH)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Tyrosine Hydroxylase (TH)  產(chǎn)品名稱：羥化酶(TH)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Tyrosine Hydroxylase (TH)  產(chǎn)品名稱：羥化酶(TH)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Placental Protein 13 (PP13)  產(chǎn)品名稱：胎盤蛋白13(PP13)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

BLAME抗體 BLAME

丁酰酯酶抗體(C端) BCHE (CT)

巴曲霉毒素單克隆抗體 Batroxobin(5H4)

蛇毒巴曲酶抗體 Batroxobin

溴脫氧尿苷抗體 BrdU

腫瘤/睪抗原2.2抗體 BAGE2

腫瘤/睪抗原2.3抗體 BAGE3

腫瘤/睪抗原2.4抗體 BAGE4

B Raf抗體 B-Raf

乳腺癌易感基因1抗體 BRCA1

腦鈉素/利鈉肽抗體 BNP

乳腺癌易感基因2抗體 FANCB

肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白小鼠大鼠肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

彈性(含100mL酶解緩沖液)10mL

NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

ACHN(人腎細(xì)胞)大鼠肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaC6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

BEL-7402(人肝細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）

MG-63(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis

UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞)KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移))

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae