蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白犬

英文名稱：Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)

CK-MM; CKMM; CK3; CK-M; MM-CK; M-CK; Creatine kinase M-type, N-terminally processed

型號：GOY-01D81

酶與激酶

心腦血管

物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞質

預測分子量：41.7kDa

實際分子量：42kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Lys11~Leu367 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：6.7

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Ornithine Decarboxylase (ODC)  產品名稱：脫羧酶(ODC)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Adenylate Cyclase 1, Brain (ADCY1)  產品名稱：腺苷酸環化酶1(ADCY1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Adenylyl Cyclase Associated Protein 1 (CAP1)  產品名稱：腺苷酸環化酶關聯蛋白1(CAP1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant 5-Lipoxygenase (5-LO)  產品名稱：花生四烯酸-5-脂加氧酶(5-LO)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant 5-Lipoxygenase (5-LO)  產品名稱：花生四烯酸-5-脂加氧酶(5-LO)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant 5-Lipoxygenase (5-LO)  產品名稱：花生四烯酸-5-脂加氧酶(5-LO)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

擬南芥ACA11抗體 ACA11

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AHA3抗體（擬南芥） AHA3

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β淀粉樣肽（25-35）抗體 beta-Amyloid(25-35)

血管緊張素I抗體 Angiotensin I

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小鼠子宮頸上皮細胞培養基C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細胞)

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

2V6.11(人胚腎細胞)糖化酵母 Saccharomyces diastaticus

日本根霉產色鏈霉菌 Streptomyces chromogenes

II型膠原酶(含10mL酶解緩沖液)小鼠垂體瘤細胞

橄欖色鏈霉菌 Streptomyces olivaceusA9(小鼠皮下結締組織細胞)

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilusIV型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)

SK-NEP-1(人腎母細胞瘤細胞)大鼠肝竇內皮細胞培養基

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae少酸鏈球菌 Streptococcus acidominimus

Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

糖化酵母 Saccharomyces diastaticus海球菌 Marinococcus sp.

狗肺成纖維樣細胞NCI-H1688(人典型小細胞肺細胞)