產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：DNA酶Ⅰ樣蛋白3(DNASE1L3)重組蛋白

英文名稱：Recombinant Deoxyribonuclease I Like Protein 3 (DNASE1L3)

DHP2; DNAS1L3; LSD; Deoxyribonuclease Gamma; Liver and spleen DNase; DNase I homolog protein DHP2

型號：GOY-01D01

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)    

亞細(xì)胞定位：細(xì)胞核, 分泌

預(yù)測分子量：33.9kDa

實際分子量：34kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Val51~Ser310 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：8.9

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格:10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

高溫需求因子A1(HTRA1)重組蛋白英文名稱：Recombinant High Temperature Requirement Factor A1 (HTRA1)HtrA; L56; ORF480; PRSS11; HtrA Serine Peptidase 1; Protease,Serine,11; IGFBP5-Protease; High-temperature requirement A serine peptidase 1

107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)重組蛋白英文名稱：Recombinant Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)INPP4; Inositol polyphosphate 4-phosphatase type I; Type I inositol 3,4-bisphosphate 4-phosphatase

107kDa肌醇多聚磷酸-4-磷酸酶Ⅰ型(INPP4A)重組蛋白英文名稱：Recombinant Inositol Polyphosphate-4-Phosphatase Type I 107kDa (INPP4A)INPP4; Inositol polyphosphate 4-phosphatase type I; Type I inositol 3,4-bisphosphate 4-phosphatase

MARCKS相關(guān)蛋白(MARCKSL1)重組蛋白英文名稱：Recombinant MARCKS Related Protein (MARCKSL1)MLP1; MRP; MLP; F52; MACMARCKS; MARCKS-like protein 1; Macrophage myristoylated alanine-rich C kinase substrate

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

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