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產品中心

當前位置:首頁產品中心分子生物學試劑核酸擴增20μL×400次PCR MasterMix

PCR MasterMix
產品簡介:

PCR MasterMix公司正*的各種產品細胞GRK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織GRK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞GRK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
組織GRK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
細胞SPHK激酶總活性定量檢測試劑盒(A/B/C)

產品型號:20μL×400次

更新時間:2025-10-31

廠商性質:經銷商

訪問量:531

服務熱線

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產品介紹

DNA提取流程圖:

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下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研

中文名稱

英文名稱

產品規格

貨號

PCR MasterMix

PCR MasterMix

20μL×400

GOY-F10284

產品詳細介紹:

本制品中含有2×Taq DNA   Polymerase2×PCR Buffer,2×dNTP,只需加入適量引物、模板和水即可進行PCR擴增。大大簡化了PCR操作,使操作更加快捷,也減少了PCR操作過程中可能導致的污染,使PCR的重復性更好。

產品用途:

利用2×PCR Master Mix可以進行各種常規的PCR擴增,特別適合用于定性和半定量的PCR擴增,以及2kb以下DNA片段的T載體克隆。

產品特點:

本產品可以擴增出長達8kb的片段,但通常更適合用于擴增2kb以下的DNA片段。

本產品穩定性高,經測試,反復凍融15次后對PCR的擴增效果無顯著影響。

保存:-20℃,至少一年有效。

 

操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.
單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNADNA污染。
c
.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7.
把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP/α1M)酶聯吸附測定試劑盒   Human AMBP (Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor) ELISA Kit  2-Iodo-3-oxo-4-azaandrostane-17-carboxylic acid  104239-97-6  中文名:  分子式:C19H28INO3 

T細胞活化連接蛋白elisa試劑盒   T細胞活化連接蛋白試劑盒   規格型號:96T/48T   T細胞活化連接蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人T細胞活化連接蛋白試劑盒、人T細胞活化連接蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。     Sitafloxacin  127254-12-0  中文名:西他  分子式:C19H18ClF2N3O3 

P糖蛋白elisa試劑盒   P糖蛋白試劑盒   規格型號:96T/48T   P糖蛋白試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人P糖蛋白試劑盒、人P糖蛋白elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Schleicheol 1  中文名:  分子式:C30H52O2 

preptinelisa試劑盒   preptin試劑盒   規格型號:96T/48T   preptin試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:人preptin試劑盒、人preptin elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  Sulfamonomethoxine   38006-08-5  中文名:磺胺間甲氧鈉  分子式:C11H11N4NaO3S  度:98.0%   

Pirin蛋白(PIR)酶聯吸附測定試劑盒   Human PIR (Pirin) ELISA Kit  2-Fluoroadenosine  146-78-1  中文名:  分子式:C10H12FN5O4
滅草煙,咪唑  Imazapyr acid  質量規格:>98% Rat soluble leptin receptor (sLR) ELISA Kit 大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒

咪唑(標準品)  Imazapyr acid  質量規格:HPLC>99%,標準品 Humanadaptormoleculeapoptoticpeptidaseactivatingfactor1,APAF1ELISAKit 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

石膽酸(標準品)  Lithocholic Acid  質量規格:>97(GC),標準品 Humanai-hepatitisDvirusaibody,ai-HDVELISA試劑盒人抗丁型肝炎病毒抗體(ai-HDV)ELISA試劑盒規格:96T/48T

氧嗪酸鉀  Potassium Oxonate  質量規格:>98% 植物0脂酶D1(PhospholipaseD1)活性比色法定量檢測試劑盒20

氧嗪酸鉀(標準品)  Potassium Oxonate  質量規格:>98%,標準品 HumanVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit人血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA試劑盒規格:96T/48T

異丁司特  Ibudilast  質量規格:>98% 小鼠基質金屬蛋白酶5(MMP-5)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP-5 ELISA Kit

異丁司特(標準品)  Ibudilast  質量規格:HPLC>99%,標準品 大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA檢測試劑盒Rathemeoxygenase2,HO-2ELISAKit 96T/48T

吉西他濱  Gemcitabine  質量規格:>98%,free base 0酸化微管相關蛋白tau(hyper phosphorylated MAPT)試劑盒 Human hyper phosphorylated MAPT ELISA kit

沙利度胺(反應停)  Thalidomide   質量規格:>98% RatThioredoxin,xELISAKit大鼠硫氧化還原蛋白(x)ELISA試劑盒規格:96T/48T

沙利度胺(標準品)  Thalidomide   質量規格:HPLC>98%,標準品 LAMBDA噬菌體DNA氯化銫化試劑盒10
PCR MasterMix
細菌胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性熒光定量檢測試劑盒

組織胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性熒光定量檢測試劑盒

細胞胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性熒光定量檢測試劑盒

植物胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthase;CGS)活性比色法定量檢測試劑盒

真菌/酵母胱硫醚-γ-合成酶(cystathionine γ-synthaseCG

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(
在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)


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