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產品中心

當前位置:首頁產品中心分子生物學試劑探針標記及檢測200μLCa2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM

Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM
產品簡介:

Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM公司正*的各種產品組織半胱-8(CASPASE-8)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞半胱-8(CASPASE-8)活性熒光定量檢測試劑盒
組織半胱-8(CASPASE-8)活性熒光定量檢測試劑盒
細胞半胱-9(CASPASE-9)活性比色法定量檢測試劑盒
組織半胱-9(CASPASE-9)活性比色法定量檢測試劑盒

產品型號:200μL

更新時間:2025-10-31

廠商性質:經銷商

訪問量:293

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Ca2+ GPCR分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM

Fluo-3, AM

200μL

GOY-F10178

產品詳細介紹:

Fluo-2 早是由Roger Tsien 博士發明的鈣離子指示劑Fluo 系列之一,目前,Fluo-3 Fluo-4 已成熟商品化。然而,Fluo-2 在細胞內比Fluo-4 要更明亮,主要可能是由于大部分細胞對FLuo-2 的加載能力要高于FLuo-4

Fluo-3 成像涉及到鈣離子信號通路的多個方面,Fluo-3 經常應用在流式細胞術上,如螯合劑光活化、第二信使、神經遞質以及細胞水平的藥理篩選。Fluo-3 在這些應用里之所以能大量運用主要是由于其幾個重要特性:Fluo-3 可以被氬離子激光器488nm 激發,并在與Ca2+結合后,發射熒光很明亮的熒光信號。Fluo-4 Fluo-3 以兩個氟原子取代氯原子的類似物,這一微小的結構變化使得Fluo-4探針在488nm 激發光下的熒光信號得到增強,信號穩定持續,可以應用于共聚焦顯微鏡、流式細胞儀、微孔板讀數儀。

Fluo-2Fluo-3 Fluo-4 在與Ca2+結合后熒光增強,與紫外激發的探針fura-2 indo-1 不同,不會發生光譜漂移。熒光光密度在與Ca2+結合后,增強至少100 倍。

儲存:-20℃,避光,有效期12個月。

 

操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅
b.
單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNADNA污染。
c
.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅
7.
把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
兔鉤端螺旋體IgGelisa試劑盒   兔鉤端螺旋體IgG試劑盒   規格型號:96T/48T   兔鉤端螺旋體IgG試劑盒,規格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進口分裝),產品別名:兔鉤端螺旋體IgG試劑盒、兔鉤端螺旋體IgG elisa試劑盒   保存條件:2-8   保質期:6個月。  4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  中文名:  分子式:C10H16N2O6S3  度:98.0%

兔鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISAKit     6-Benzyloxyindole  15903-94-3  中文名:6-芐氧基吲哚  分子式:C15H13NO 

兔鉤端螺旋體IgG(Lebtospira)ELISA試劑盒     4-Hydroxy-2-(3-methoxypropyl)-3,4-dihydro-2H-thieno[3,2-e][1,2]thiazine-6-sulfonamide 1,1-dioxide  154127-42-1  中文名:  分子式:C10H16N2O6S3 

兔睪(rabbit TESTO)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  4-Difluoromethoxy-3-hydroxybenzaldehyde  151103-08-1  中文名:  分子式:C8H6F2O3  度:98.0%  關鍵詞: 

兔干細胞因子(rabbit SCF)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  4-Chlorotestosterone acetate  855-19-6  中文名:醋酸氯  分子式:C21H29ClO3  度:98.0%  關鍵詞:
十二烷基硫酸鋰  Lithium Dodecyl Sulfate  質量規格:>98%,分子生物學級 MousesubstancePreceptor,SP-RELISA試劑盒小鼠P物質受體(SP-R)ELISA試劑盒規格:96T/48T

硫代甜菜堿 8  Sulfobetaine 8  質量規格:>98%,sigma分裝 小鼠顆粒酶B(GZMB)ELISA試劑盒 ,英文名: GZMB ELISA Kit

硫代甜菜堿 10  Sulfobetaine 10  質量規格:>98%,BR 人晚期糖基化終末產物受體(RAGE/AGER)ELISA檢測試劑盒Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit 96T/48T

硫代甜菜堿 12  Sulfobetaine 12,SDDAB  質量規格:>98%,BR 大鼠血清素(5-羥色胺)-N-乙酰基轉移酶(AANAT)試劑盒 Rat Serotonin N-acetylansferase,AANAT ELISA kit

恩他卡朋;COMT抑制劑  Entacapone  質量規格:>99%,BR 英文名稱RatLBPELISAKit大鼠脂多糖結合蛋白(LBP)規格:96T/48T

曲拉通X-114  Triton X-114  質量規格:BC 高多糖多酚植物組織葉綠體DNA萃取試劑盒10/20

曲拉通X-405  Triton X-405  質量規格:70% in H2O ELISAKitFree-T3人游離三甲狀腺原規格:48T/96T

CHAPS;3-[3-(膽酰胺丙基)二甲氨基]-1-丙磺酸  CHAPS  質量規格:>98.5% 小鼠顆粒酶A(Gzms-A)ELISA試劑盒 ,英文名: Gzms-A ELISA Kit

CHAPSO3-[(3-膽氨丙基)二甲基氨基]-2-羥基-1-丙磺酸  CHAPSO  質量規格:>99%,分子生物學級; 大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA檢測試劑盒RatTissuePolypeptideAigen,TPAELISAKit 96T/48T

二硫赤蘚(DTE)1,4-二硫代赤蘚  1,4-Dithioerythritol   質量規格:>99%,進分sigma 人蛋白激酶C beta II(PKC-bII)試劑盒 Human Protein Kinase C beta II,PKC-bII ELISA Kit
Ca2+ GPCR
分析-鈣離子指示探針 Fluo-3, AM組織C-TAK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細胞C-TAK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織B-RAF激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細胞B-RAF激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織AMPK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(
在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)


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