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產品型號：50微升
更新時間：2025-10-31
廠商性質：經銷商
訪問量：334
服務熱線021-39596320
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DNA提取流程圖：
下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產品規格 | 貨號 |
細胞內鈣離子熒光探針(Fura-2 AM) | Fura-2 pentakis ester | 50微升 | GOY-F10143 |
產品詳細介紹：
本品是常用的檢測細胞內鈣離子濃度的熒光探針之一。 用于細胞內鈣離子檢測時，Fura-2 AM的常用濃度為0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fura-2 AM的適當溶液和細胞一起在4-37℃孵育15-60分鐘，即可完成熒光探針的裝載。 本Fura-2 AM(鈣離子熒光探針)是配制于無水DMSO(anhydrous DMSO)中的儲存液，濃度為2mM。 分子式：C44H47N3O24 分子量：1001.9 Fura-2 AM是一種可以穿透細胞膜的熒光染料。Fura-2 AM的熒光比較弱，大激發波長為369nm，大發射波長為 478nm，并且其熒光不會隨鈣離子濃度改變而改變。Fura-2 AM進入細胞后可以被細胞內的酯酶剪切形成Fura-2，從而被滯留在細胞內。Fura-2可以和鈣離子結合，結合鈣離子后在330-350nm激發光下可以產生較強的熒光，而在380nm激發光下則會導致熒光減弱。這樣就可以使用340nm和380nm這兩個熒光的比值來檢測細胞內的鈣離子濃度，可以消除不同細胞樣品間熒光探針裝載效率的差異，熒光探針的滲漏，細胞厚度差異等一些誤差因素。Fura-2和鈣離子結合后，大激發波長為335nm(大激發波長隨離子濃度的的不同而有所不同)，大發射波長為505nm。實際檢測時推薦使用的激發波長為340nm，發射波長為510nm。如果做雙波長檢測，則推薦使用的激發波長為340nm和380nm。Fura-2的激發光譜參考下圖，不同曲線表示不同鈣離子濃度時的激發光譜。 Fura-2相對而言有較強的抗熒光淬滅能力，在熒光顯微鏡或其它熒光檢測設備上可以連續檢測1小時而不明顯影響其熒光效果。 注意事項： 1. 本Fura-2 AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。 2. 熒光染料均存在淬滅問題，請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。 儲存條件：-20℃，有效期6個月。 |
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定，不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNA有DNA污染。
c．細胞懸液 離心收集細胞，每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol，反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質，脂肪，多糖或胞外物質（肌肉，植物結節部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時，上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機相，上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉移到新管中，如要分離DNA和蛋白質可保留有機相，進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
兔血栓調節蛋白(rabbit TM) 作用： ELISA 規格： 48T/96T 進口分裝 4-Chlorotestosterone acetate 中文名：醋酸氯 分子式：C21H29ClO3 度：98.0%
兔血栓素B2elisa試劑盒 兔血栓素B2試劑盒 規格型號：96T/48T 兔血栓素B2試劑盒，規格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產品別名：兔血栓素B2試劑盒、兔血栓素B2 elisa試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質期：6個月。 7-Acetoxy-4-methylcoumarin 中文名：7-乙酰氧基-4-甲基 分子式：C12H10O4 度：95.0%
兔血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒 5-Fluorouracil 51-21-8 中文名： 分子式：C4H3FN2O2 度：98.0% 關鍵詞：
兔血栓素B2(TXB2)ELISAKit 4-Aminohippuric acid 61-78-9 中文名：4-氨基馬尿酸 分子式：C9H10N2O3
兔血清總補體(CH50)ELISA試劑盒 5-Fluorouracil 51-21-8 中文名： 分子式：C4H3FN2O2
(分析標準品,>99.5%(GC)) Lauric acid 質量規格：分析標準品,>99.5%(GC) 英文名稱RatHistamineELISAKit大鼠組胺(Histamine)規格：96T/48T
神經酸(分析標準品,≥99.0%(GC)) Nervonic acid 質量規格：分析標準品,≥99.0%(GC) 鈣離子膜通道鈣交換體(NCX/線粒體)功能熒光檢測試劑盒20
十五烷酸(分析標準品,≥99.5%(GC)) Pentadecanoic Acid 質量規格：分析標準品,≥99.5%(GC) ELISAKitTI人真胰島素規格：48T/96T
泛酸鈣一水合物(標準品) (+)-Pantothenic acid calcium salt hydrate 質量規格：分析標準品 小鼠粒細胞趨化蛋白2(GCP2)ELISA試劑盒 ，英文名： GCP2 ELISA Kit
山梨酸鉀(標準品) Potassium sorbate 質量規格：分析標準品 人補體片斷4b(C4b)ELISA檢測試劑盒HumanComplemefragme4b,C4bELISAKit 96T/48T
全氟辛酸(分析標準品, 用于環境分析) Pentadecafluorooctanoic acid 質量規格：分析標準品, 用于環境分析 大鼠血小板衍生生長因子AA(PDGF-AA)試劑盒 Rat Platelet-Derived Growth Factor AA,PDGF-AA ELISA kit
正辛酸(分析標準品,≥99.9%(GC)) n-Octanoic acid 質量規格：分析標準品,≥99.9%(GC) 英文名稱RatHistamineELISAKit大鼠組胺(Histamine)規格：96T/48T
蓖麻油酸(分析標準品,99%) Ricinoleic acid 質量規格：分析標準品,99% 鈣離子膜通道鈣交換體(NCX/質膜)功能熒光檢測試劑盒20
硬脂酸(分析標準品,≥99.5%(GC)) Stearic acid 質量規格：分析標準品,≥99.5%(GC) ELISAKitMEC/CCL28人粘膜相關上皮趨化因子規格：48T/96T
甜蜜素(標準品) Cyclamate 質量規格：分析標準品 小鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒 ，英文名： GMCSF/CSF2 ELISA Kit
細胞內鈣離子熒光探針(Fura-2 AM)細胞BMK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織BLK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細胞BLK激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
組織AX1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
細胞AX1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C）
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
