名稱    VCaP (前列腺癌細胞) (STR鑒定正確)
別稱 VCAP; Vcap; Vertebral Cancer of the Prostate

種屬 人類

年齡（性別） 男性，59歲

組織來源 器官：前列腺； 組織：脊椎轉移； 疾病：癌

生長特性 貼壁細胞

細胞形態 上皮細胞樣

背景描述 VCaP細胞是于1997年從一位不受激素影響的前列腺癌患者脊椎轉移灶中建立的細胞株。VCaP細胞先在小鼠中進行異種移植傳代，隨后進行體外培養；體內及體外VCaP細胞都對雄性激素敏感。最近發現，前列腺癌細胞Vcap細胞在異種移植到小鼠時可能需要小鼠親異逆轉錄病毒Bxv-1。

生物安全等級 2

生長培養基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~53-144小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude and SCID mice.

抗原表達情況 cytokeratin-18; Homo sapiens, expressed p53 antigen; Homo sapiens, expressed prostate specific antigen (PSA); Homo sapiens, expressed prostatic acid phosphatase (PAP); Homo sapiens, expressed Rb protein; Homo sapiens, expressed

基因表達情況 cytokeratin-18; Homo sapiens, expressed, p53 antigen; Homo sapiens, expressed, prostate specific antigen (PSA); Homo sapiens, expressed, prostatic acid phosphatase (PAP); Homo sapiens, expressed, Rb protein; Homo sapiens, expressed

注意事項 該細胞貼壁疏松，影響細胞生長，建議使用多聚-L-賴氨酸溶液包被培養瓶后進行培養，請提前準備多聚-L-賴氨酸溶液（貨號 PB180523）。

保藏機構 ATCC; CRL-2876 ECACC; 06020201
我司全程提供細胞生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態、培養條件、應用、組織、凍存條件等復蘇及凍存細胞株說明書信息，我們專業您的細胞系實驗，讓您實驗再無煩擾！產品僅用于科研

細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

dCTP 溶液，2.5mM2mL  鈣蛋白酶抑制劑Ⅰ溶液，10mg/mL10mL

dCTP 溶液，100mM0.5mL  改良 Lowry 法蛋白定量試劑盒1000 次

Deaza dGTP0.4mL  福林酚試劑100mL

雙脫氧 dNTP 套裝40uL×4  糞便 DNAout30 次

dNTP 和引物清除劑100 次  糞便 DNAout100 次
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