名稱    T84 (結腸腺癌肺轉移細胞) (STR鑒定正確)
別稱 T-84; T 84

種屬 人類

年齡（性別） 男性，72歲

組織來源 器官：結腸；疾病：結直腸癌；取材轉移灶：肺

生長特性 貼壁細胞

細胞形態 上皮細胞樣

背景描述 T84細胞是從一位72歲男性結腸癌患者的肺轉移灶建立的可移植人類癌細胞株；腫瘤組織皮下接種于BALB/c裸鼠，并連續進行移植。在裸鼠身上的移植過程中，細胞株始終保持結腸癌的原始組織性狀。在無胸腺小鼠中傳代23代后建立了T84細胞。T84細胞單層生長到飽和并在接觸細胞間展現出緊密連接和橋粒，有很多關于多肽類激素和神經遞質并維持定向電解質傳輸的受體。T84細胞展現了接觸細胞中的緊密連接和橋粒，角蛋白免疫過氧化物酶染色陽性。

生物安全等級 1

生長培養基 DMEM/F12＋5% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

受體表達情況 neurotransmitter, expressed; peptide hormone, expressed

基因表達情況 carcinoembryonic antigen (CEA), 600ng/mL per 1×10^6 cells per 10 days; keratin

保藏機構 ATCC; CCL-248 ECACC; 88021101
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細胞培養的優點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據要求可始終保持細胞活力，并可長時間監控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態、結構、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養一定代數后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩定細胞狀態。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養瓶中的培養基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%消化液約1mL至培養瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的*培養基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養箱中培養；
4) 待細胞*貼壁后，培養觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養基。

細胞培養操作規程：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優質胎牛血清，10%。
2）培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

Cycloheximide50mg  CFDA SE ( 細胞增殖示蹤熒光探針 )5mg

Cyclosporin A( 免疫抑制劑 /PP2B 抑制劑 )50mg  cDNA 第一鏈合成試劑盒50 次

Decitabine 地西他濱5mg  cDNA 第一鏈合成試劑盒10 次

Doxorubicin(Adriamycin) 100μL  cDNA 第二鏈合成試劑盒30 次

Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL  Catechin hydrate( 抗氧化劑 )0.5g
大鼠L選擇素(L-Selectin/CD62L)elisa檢測試劑盒免費代測

大鼠L-乳酸脫氫酶(L-LDH) elisa檢測試劑盒

大鼠KiSS-1受體(KISS1R)elisa檢測試劑盒

大鼠KI-67 elisa檢測試劑盒

大鼠Kelch樣ECH相關蛋白1(KEAP1)elisa檢測試劑盒免費代測
T84 (結腸腺癌肺轉移細胞)大鼠G蛋白偶聯膽汁酸受體1(GPBAR1)elisa檢測試劑盒

大鼠ICAM-1elisa檢測試劑盒

大鼠IgEelisa檢測試劑盒

大鼠III型前膠原肽（PIIINP）elisa檢測試劑盒

大鼠II型角蛋白,細胞骨架71(KRT71)elisa分析檢測試劑盒