昆蟲卵巢細胞；Sf21說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 昆蟲卵巢細胞；Sf21說明書
形態特性  圓形，多形
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞系源于雌性草地貪夜蛾蛹的卵巢組織，是Sf9細胞的克隆系，可以用于昆蟲病毒的基礎研究和復制桿狀病毒表達載體。 
培養條件  Grace's Insect Medium (GIM w/o BSA, FCS, Whole Egg Ultrafiltrate)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C11
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺細胞 Human
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus
蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis
SW 1353(人骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
溝腸桿菌 Enterobacter cloacae
牛糞枝孢 Cladosporium stercorarium
膠原酶(含100mL酶解緩沖液)10mL
小鼠神經干細胞（EGFP標記） Mouse
異常畢赤酵母 Pichia anomala
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
HPAC(人胰腺腺泡上皮)5×106cells/瓶×2
瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus
刺孢吸水鏈霉菌北京變種 Streptomyces hygrospinosus var. beigingenis
大鼠腎小管平滑肌細胞*培養基100mL
檸檬串珠菌 Leuconostoc citreum
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
BC-019(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
根瘤菌 Rhizobium sp.CUPROUS TRIFLUOROMETHANESULFONATE TOLUENE COMPLEX    三烷磺酸亞銅絡合物（2:1）    48209-28-5
Disodium pytophosphate    焦磷酸二氫二    7758-16-9
2-Methyl-4,6-dinitrophenol    4,6-二基鄰酚    534-52-1
Bis(4-amino-2-chloro-3,5-diethylphenyl)methane    4,4'-亞基雙(3--2,6-二乙基胺)    106246-33-7
FETAL BOVINE SERUM USA ORIGIN    胎牛血清    
2,8-BIS(TRIFLUOROMETHYL)-4-BROMOQUINOLINE    4-溴-2,8-二(三基)喹啉    35853-45-3
N,N,N',N'-TETRAKIS(2-HYDROXYETHYL)ETHYLENEDIAMINE    N,N,N',N'-四(2-羥乙基)乙    140-07-8
2-Chloro-4-hydroxypyridine    2--4-羥基吡啶    17368-12-6
METHYL 3-MORPHOLINOPROPIONATE    4-啉丙酸酯    33611-43-7
Tetrahydropyran    四氫吡喃    142-68-7
3,5-Dichlorobenzylamine    3,5-二芐胺    39989-43-0
Ethyl (4-methylthiophenyl)acetate    4-硫基乙酸乙酯    14062-27-2
2-N-HEXYLCYCLOPENTANONE    2-己基環    13074-65-2
L-Asparagine tert-butyl ester    L-天冬酰胺叔丁酯    25456-86-4
4-Nitrotoluene    對基    99-99-0
tert-Butyl carbazate    叔丁氧羰基肼    870-46-2
2-Methylpyrimidine    2-基嘧啶    5053-43-0
Protopine    原阿片    130-86-9