白鰱尾鰭細胞系；SCF說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱白鰱尾鰭細胞系；SCF說明書
形態特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  白鰱尾鰭細胞由長江水產所建立鑒定，用于白鰱尾鰭魚基礎研究和病毒疾病防治研究。 
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C15
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 同工酶鑒定
染色體 
使用權限 A類

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

植物桿菌 Lactobacillus plantarum
黑色鏈霉菌 Streptomyces niger
大鼠骨髓基質細胞*培養基100mL
鞘氨醇桿菌屬 Sphingobacterium sp.
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
RBL-2H3(大鼠嗜堿性細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
根瘤菌 Rhizobium sp.
Tris(三羥甲基氨基甲烷)500g國產
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
冬擬多孔菌
枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
HBL-100(人整合SV40基因的腺上皮細胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌霍氏亞種 Lactococcus lactis subsp. hordniae
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
Saos-2，人成骨肉瘤細胞
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus
毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes
蘇云金芽胞桿菌蘇云金變種 Bacillus thuringeinsis subsp. thuringeinsis
中性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mLParaformaldehyde    多聚    30525-89-4
1-Bromo-3,5-dimethyladamantane    1-溴-3,5-二基金剛烷    941-37-7
Ethylenzene    乙基    100-41-4
5-Azacytidine    5-氮胞苷    320-67-2
2-Ethylimidazole    2-乙基咪唑    1072-62-4
2'-DEOXY-5-FLUOROCYTIDINE    5-脫氧胞苷    10356-76-0
(S)-(-)-2,2'-BIS(DI-P-TOLYLPHOSPHINO)-1,1'-BINAPHTHYL    (S)-(-)-2, 2-雙（二對基膦）-1,1-二聯萘    100165-88-6
N-ACETYL-L-TYROSINE ETHYL ESTER    N-乙酰-L-酪氨酸乙酯一水物    840-97-1
2-Acetamidoacrylic acid    2-乙酰氨基丙酸    5429-56-1
2,5-Dibromoterephthalic acid diethyl ester    2,5-二溴對二酸二乙酯    18013-97-3
Levodopa    左旋多巴    59-92-7
5-BROMOPYRIDINE-3-SULFONYL CHLORIDE    5-溴吡啶-3-磺酰    65001-21-0
Cellulose diacetate    二醋酸纖維素    9035-69-2
L-Threonic acid calcium salt    L-蘇糖酸鈣    70753-61-6
2-Amino-5-chloro-3-methylbenzoic acid    2-氨基-5--3-基酸    20776-67-4
4-Ethoxybenzoic acid    4-乙氧基酸    619-86-3
N-Hydroxy-5-norbornene-2,3-dicarboximide    N-羥基-5-降冰片-2,3-二酰亞胺    21715-90-2