綿羊肺細胞；OAR-L1說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 綿羊肺細胞；OAR-L1說明書
形態特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞系來源于一雌性綿羊的肺組織。1990年由中國科學院昆明細胞庫建立。 
培養條件  McCoy's 5A Media (Modified with Tricine)  15%NBS
傳代方法  1：2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體 
使用權限 A類

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

Raji(人Burkitt's淋巴瘤細胞)    5×106cells/瓶×2    gersion        
Dami(人巨核細胞白血病細胞)    5×106cells/瓶×2            
MSTO-211H(人肺細胞)    5×106cells/瓶×2    gersion        
RH-35(大鼠肝細胞)    5×106cells/瓶×2            
II型膠原酶(含100mL酶解緩沖液)    10mL            
CHL(倉鼠肺細胞)    5×106cells/瓶×2            
Flag Tag IP/Co-IP Kit/Flag標簽免疫沉淀試劑盒    25次        試劑盒    
小鼠食管上細胞*培養基    100mL            
BC-019(人腺細胞)    5×106cells/瓶×2            
小鼠腸上細胞*培養基    100mL            
胰酶細胞消化液    規格：        100ml    
人胎盤絨毛膜細胞*培養基    100mL            
MCPC培養基添加劑/MCPC Medium Supplement    每瓶添加于100ml MCPC培養基中    國產/進口    5毫升    
人卵巢細胞    英文名稱：        HO-8910    
大腸桿菌&大腸菌群顯色培養基/E.Coli&Coliform Chromogenic Medium    同時檢測大腸菌群和大腸桿菌，培養24小時，大腸桿菌顯紫色，大腸菌群顯紅色    國產/進口    1升    
尼氏(Nissl)染色液    規格：        100ml    
賴氨酸脫羧酶培養基/Lysine Decarboxylase Medium    用于細菌賴氨酸脫羧酶試驗    國產/進口    5克  瓊脂糖凝膠 2B    CAS9050-94-6    100mL
SDS-PAGE 分離膠配膠液    100868-500    500mL
10 次    柱式植物 mtDNAout，測序    
10g    硫酸葡聚糖    
5 mg    羧肽酶 B( 豬胰 )    
50 T    ATP 酶測試盒 ( 組織及細胞膜需高速離心 )    
羧肽酶 B( 豬胰 )    CAS9025-24-5    5 mg
山羊抗小鼠 IgG(H+L), 堿性磷酸酶標記    131144-100    100μL
大提柱式動物 RNAout    80901-5    5次
50 次    木材 DNAout    
10g    4- 甲基傘形酮    
5mL    卵巢上皮細胞生長因子    
1.5mL    β- 乙醇，電泳    
尿道上皮細胞生長因子    21-0240-5     5mL
RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5    60704-100    100mL
2mg    PD 98059(MAPKK 抑制劑 )    
250 mL    Baker 甲醛鈣中性固定液    
18mg    Insulin    
100g    RNA  EDTA·2Na ( 乙二胺四二 )    
L-Arginine(NO 前體 )    23-0360-5    5g
柱式尿液 DNAout    90314-50    50 次
100mL    RNA 電泳液 ,10×    
100 μL    COX IV 小鼠單抗    
5mL    dNTP 溶液，2.5mM