人肺巨細胞癌高轉移系；PGBE1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肺巨細胞癌高轉移系；PGBE1圖片
形態特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  PGBE1由朱偉勇和鄭杰于1995年建系。源自人肺巨細胞癌系分離了多個單細胞克隆，經體外侵襲實驗和裸鼠體內接種相結合進行了初步鑒定后，挑選其中３個克隆化細胞亞系之一。該細胞在裸鼠體內的成瘤率均為１００％，淋巴結轉移率為９４％。 
培養條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C7
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR  STR鑒定
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

先鋒溶液 ,100mg/mL1mL
古細菌種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
土鹽10g
生物素標記的 Oligo(dT)5μg
CAS9007-49-2鮭魚精 DNA100mg
12-244Novablue(DE3) 菌種1mL
鹽酸壯觀1g
IPTG 溶液，200mg/mL1.5mL
蘇木色精10g
Western 封堵液500mL
CAS75277-39-3N-2- 羥乙基 -N’-2- 乙基磺酸25g
60203-1硫酸新干粉1g
乙酰水楊酸100g
金胺 O5g
D- 氨基葡萄糖鹽10g
一步法 96 孔板質粒 DNAout( 真空法 )1次
CAS6342-17-21,4- 雙丙烯酰1g
131020-10Sephacryl S-400 基質10mL
中草藥 DNAout100 次
lambda(λ)DNA5μg
過氧化氫酶 ( 牛肝 )1g
雙染細胞凋亡檢測試劑盒（Annexin V-PE·7-AAD） 20 次人尿肌酐(UCR)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人硫酸褪黑色素(MS)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人可溶性血纖蛋白單體復合物(SFMC)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAG)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人基質金屬蛋白酶12（MMP-12）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人風疹毒抗體(RV-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人成纖維細胞生長因子23(FGF-23)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人白喉抗體(Diphtheria Ab)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人α2纖溶酶抑制物(α2-PI)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
人4羥基壬烯酸（4-HNE）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
犬白細胞分化抗原8(CD8)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
牛膽酸(Cholic acid)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝
雞瘦素(LEP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒組裝/原裝