人食管癌細胞；TE-11圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人食管癌細胞；TE-11圖片
形態特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性   
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件  *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

一站式 His 標記蛋白質微量純化套裝20 次
Western 印跡膜封膜液 ( 尼龍膜 )100mL
碘代乙酰胺5g
Tris 緩沖鹽溶液 (TBS)10 包
101103B-1玻璃勻漿器 ,2mL1套
SP6 體外轉錄試劑盒50 次
可溶性兩性 B25mg
DNA 電泳分子量標準 (300-10000 bp)50 次
Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)20μL
Rosetta(DE3) 感受態細胞0.1mL×10
30-100常用PCR引物100uL
Lambda 核酸外切酶1000U
PDTC(NF-κB 抑制劑 / 抗氧化劑 )1g
17-0120MboI500U
一站式 SDS-PAGE 電泳套裝30 次
130544-5AEBSF 溶液，10mg/mL5mL
兔抗山羊 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標記100 μL
維生素 D31gYeast Protein Extraction Kit/酵母蛋白抽提試劑盒25次、100次國產
MDA-MB-231（ATCC來源）, 人腺細胞
Ammonium Persulfate(APS)20g國產
純化瓊脂粉/寒天/瓊脂/洋菜/石花菜/瓊膠/AgarBR，強度400g/c㎡250克國產/進口
亞硫酸鹽瓊脂/Sulfite Agar厭氧亞硫酸鹽還原桿菌試管計數250克國產/進口
MDA-MB-435S(人腺導管細胞)5×106cells/瓶×2gersion
BT-549(人腺管細胞)5×106cells/瓶×2
BCIP/NBT堿性磷酸酶顯色試劑40ml國產
人咽鱗細胞英文名稱：FaDu
TMP瓊脂培養基/TMP Agar金黃色葡萄球菌的分離培養250克國產/進口
四環素檢定瓊脂/Tetracyline Examination Agar副溶血性弧菌的選擇性分離培養250克國產/進口
TE-1(人食管細胞)5×106cells/瓶×2
HEC-1-A(人子宮內膜腺細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠卵巢上細胞*培養基100mL
3% NaC1V-P半固體發酵管BR20支國產/進口
人卵巢細胞英文名稱：HO-8910
ZR-75-1(人腺細胞)5×106cells/瓶×2
MDA-MB-231, 人腺細胞gersion
Ana-1(小鼠巨噬細胞)5×106cells/瓶×2
長效期 SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L