Cas9穩(wěn)定表達(dá)的人乳腺癌細(xì)胞；231-Cas9-546說(shuō)明書(shū)現(xiàn)貨直銷，免費(fèi)快遞送貨上門(mén)。公司供應(yīng)各種細(xì)胞株，細(xì)胞系，種類齊全，現(xiàn)貨，質(zhì)量保證，公司所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于醫(yī)學(xué)診斷。使用前仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)。

細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞是采用慢病毒感染的方式使MDA-MB-231細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)Cas9-Flag-Neo，經(jīng)400ug/mlG418篩選得到的單克隆，經(jīng)Western Blotting驗(yàn)證該克隆可以表達(dá)Cas9蛋白，可直接用Crispr技術(shù)編輯基因組DNA。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；400ug/ml G418
傳代方法  1:2~1:4傳代；每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：12,13；D12S391：17,18；D13S317：13,13；D16S539：12,12；D18S51：11,16；D19S433：11,14；D21S11：30,33.2；D2S1338：20,21；D3S1358：16,16；D5S818：12,12；D6S1043：18,18；D7S820：8,9；D8S1179：13,13；FGA：22,23；Penta E：11,11；TH01：7,9.3；TPOX：8,9；vWA：15,18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
運(yùn)輸保存：
采用干冰保存運(yùn)輸。收到細(xì)胞時(shí)，若干冰已經(jīng)*融化，請(qǐng)立即將細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請(qǐng)立即將細(xì)胞放入液氮中保存待用，請(qǐng)按條件貯存細(xì)胞，切不可將細(xì)胞置于高溫環(huán)境。
保存條件：4℃保存一年;-20℃長(zhǎng)期保存
用途：只可用于科研。
儲(chǔ)存：液氮。
運(yùn)輸：干冰(第二代培養(yǎng)末期液氮凍存)。
細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。
注意：*次植入后，在6-16小時(shí)內(nèi)更換培養(yǎng)基，以去除殘留的二甲基亞楓和死亡細(xì)胞。到達(dá)客戶手中，出現(xiàn)任何問(wèn)題（人為或者非人為），導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。對(duì)于細(xì)胞的真實(shí)性，支持客戶檢測(cè)對(duì)應(yīng)的biomarker，（如證明細(xì)胞錯(cuò)誤，全額退款。）公司針對(duì)每株細(xì)胞，鑒定gene background，鑒定完成的細(xì)胞可以提供數(shù)據(jù)，用于證明細(xì)胞的真實(shí)性，并且?guī)椭蛻舾嗟牧私饧?xì)胞特性。
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。柱式凍存血液 DNAout50 次
18-0160-25超微量 ATP 酶測(cè)試盒 ( 測(cè) Ca2+Mg2+ATPase)25 T
101213-100DNA  GuSCN( 異硫氰酸胍 )100g
SUMO 蛋白酶5μg
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)pBR322/BstN I50 次
柱式血液 RNAout50 次
Stb12 菌種1mL
121103-250熱啟動(dòng) Tth DNA 聚合酶250U
90506-50膠回收及 PCR 片段純化兩用試劑盒50 次
酸性磷酸酶1g
大提柱式植物 RNAout5次
SDS-PAGE 上樣液，5×10mL
β-Tubulin 小鼠單抗1000μL
131228-500Tth 核酸內(nèi)切酶 IV500U
90302-5MgCl2溶液，25mM，PCR 5mL
陶瓷研缽 ( 直徑 75 mm)1個(gè)
ECL 法生物素雜交檢測(cè)試劑盒5次
大提柱式 DNA 清除劑5次tert-Butyl hydroperoxide過(guò)氧化氫叔丁醇75-91-2
TRIFLUOROMETHANESULFONAMIDE三磺酰胺421-85-2
Oxazole-2-amine2-氨基惡唑4570-45-0
2,5,6-TRIMETHYLBENZOXAZOLE2,5,6-三基并唑19219-98-8
Calconcarboxylic acid鈣試劑羧酸3737-95-9
Litmus paper blue藍(lán)石蕊試紙
LEAD(II) SULFIDE硫化鉛1314-87-0
2-Bromo-5-fluorobenzyl bromide2-溴-5-溴芐112399-50-5
NA天然龍腦
cis-3-Hexenyl phenylacetate乙酸葉醇酯42436-07-7
Isoprocarb異丙威2631-40-5
Dichloromethane二烷1975/9/2
SUCCINALDEHYDIC ACID琥珀半 溶液692-29-5
Trimethyl phosphate磷酸三酯512-56-1
Ethinamide乙硫異煙胺536-33-4
NA植物油酸
1-Diazo-2-naphthol-4-sulfonic acid1-重氮-2-萘酚-4-磺酸887-76-3
Ingrain Blue 1阿爾新藍(lán) 8GX33864-99-2
Ruthenium acetylacetonate乙酰丙釕(III)14284-93-6
2-Bromoaniline2-溴胺615-36-1
2-Chloroethyl ethyl ether1--2-乙氧基乙烷628-34-2
Benzoyleneurea2,4-喹唑啉二86-96-4
DPX-T5648嘧磺隆74222-97-2
單細(xì)胞裂解液 (DNA)1mL
27重組蛋白（非病毒）--
131128A-100動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 1100 次
X 光片 (5×7 英寸 )1盒