青色熒光蛋白標記人結直腸癌細胞；HCT116-CFP圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 青色熒光蛋白標記人結直腸癌細胞；HCT116-CFP圖片
形態特性  上皮樣；多角形
生長特性 貼壁生長
特征特性  CFP穩定表達 
培養條件  IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  10%FBS
傳代方法  1:3傳代；3~4天1次。
傳代情況 
凍存條件  基礎培養基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

T4 RNA 連接酶 2( 截短型 )2000U
蛋白酶 K 溶液，10mg/mL1.5mL
Tricine-SDS-PAGE 配膠液1000mL
小鼠抗 GFP 標簽單抗100μL
131027-250胃蛋白酶250mg
130914-2dGTP 溶液，2.5mM2mL
通用洗柱液250mL
二硫赤蘚醇1g
α- 環狀糊精250mg
絲狀真菌線粒體 DNAout15 次
CAS56-41-7L- 丙氨酸25g
131129N-100轉 Lectin 基因植物 PCR Mix100 次
細胞計數液 (Vi-CELL 儀 )100 次
剛果紅5g
赤蘚紅 B 二鹽5g
DNA 上樣液 ( 紅 ),6×( 非甘油 )10mL
CAS9007-43-6細胞色素 C100mg
12-235JF1125 菌種1mLSolvent Violet 13試劑81-48-1
Diflubenzuron除蟲脲35367-38-5
Cobalt sulfate heptahydrate硫酸鈷，七水10026-24-1
2-Carboxybenzaldehyde鄰羧基119-67-5
Hexyl acetate乙酸己酯142-92-7
(R)-(+)-2,2'-Bis(diphenylphosphino)-1,1'-binaphthyl(R)-(+)-2,2'-雙(二膦基)-1,1'-聯萘76189-55-4
Ethylenediaminetetraacetic acid乙四乙酸60-00-4
6-THIOGUANOSINE6-硫鳥嘌呤核苷85-31-4
Bisoprolol fumarate富馬酸比索洛爾104344-23-2
ADENOSINE-5'-MONOPHOSPHATE DISODIUM SALTAMP149022-20-8
(1S,2S)-(+)-N-(4-Toluenesulfonyl)-1,2-diphenylethylenediamine(1S,2S)-(+)-N-對磺酰基-1,2-二基乙167316-27-0
Ethyl isobutyrate異丁酸乙酯97-62-1
Sodium levothyroxine左旋狀腺素25416-65-3
3-(3-AMINOPHENYL)PROPIONIC ACID間氨基丙酸1664-54-6
Eugenol丁香酚97-53-0
NA水質標樣
NA有機擔體
Aminomethanesulfonic acid氨基磺酸13881-91-9
N-Boc-1,4-cyclohexanediamineN-Boc-1,4-環己195314-59-1
3,5-Dimethylphenylacetic acid3,5-二基乙酸42288-46-0
亞精胺 ( 精脒 )1g
環狀 DNA 全基因組擴增試劑盒30 次
地塞米松100mg
堿性磷酸酶標記親和素100mg