人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H524圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞；NCI-H524圖片
形態(tài)特性  圓形
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細(xì)胞1982年建系，源自非小細(xì)胞肺癌男性患者的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10% FBS
傳代方法 
傳代情況 P21
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：12；D13S317：12；D16S539：12；D18S51：12，13；D19S433：16；D21S11：29，30；D2S1338：16，17；D3S1358：15；D5S818：12；D7S820：11，12；D8S1179：13，15；FGA：21，22，25；TH01：8，9.3；TPOX：8，10；vWA：14，17；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

CAS9003-39-8聚乙烯吡咯烷酮 40000100g
81211-250Western 印跡膜洗膜液250mL
130699-3000RNase 抑制劑 ( 小鼠源 )3000U
牛血清白蛋白5g
Calcein Blue 250mg
非凍型血液 DNA 保存液100mL
茜素紅 S 染色試劑盒100mL
18-0620-100一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學(xué)法 )100 T
100808-1溴化乙錠干粉 (EB)1g
神經(jīng)氨酸酶檢測試劑盒100 次
DNA 快速連接試劑盒100 次
BCA 法蛋白定量試劑盒500 次
克必隆 eTS miRNA cDNA 文庫構(gòu)建試劑盒1套
130645-808- 氧代鳥嘌呤 DNA 糖基化酶80U
100921-25地高標(biāo)記 dUTP 溶液25μLPhenylmethylsulfonyl fluoride基磺酰329-98-6
2-Methyl-3-buten-2-ol2-基-3-丁-2-醇115-18-4
2-Thioxanthine2-硫代黃嘌呤2487-40-3
Sodium octyl sulfate基硫酸142-31-4
Panaxadiol人參二醇19666-76-3
1-BUTYLPYRIDINIUM HEXAFLUOROPHOSPHATEN-丁基吡啶六磷酸186088-50-6
Desoxycholate Lactos去氧膽酸瓊脂
4-CHLORO-2-FLUOROIODOBENZENE4--2--1-碘6797-79-1
NA對基阱
POLY(ETHYLENE GLYCOL SUCCINATE)聚（1,4-丁二醇丁二酸）酯25569-53-3
2-DI-TERT-BUTYLPHOSPHINO-2',4',6'-TRIISOPROPYLBIPHENYL2 - 二叔丁基膦-2'，4'，6' -三異丙基聯(lián)564483-19-8
Tin tetrachloride四化錫7646-78-8
1,1,1,2-TETRACHLOROETHANE1,1,1,2-四乙烷630-20-6
5-CHLORO-2-METHOXYBENZONITRILE5--2-氧基55877-79-7
Di-tert-butyl dicarbonate二碳酸二叔丁酯24424-99-5
3,3'-Dimethoxybenzidine dihydrochloride聯(lián)大茴香胺酸20325-40-0
Carnosic acid鼠尾草酸3650--09-7
4-Methylumbelliferyl-beta-D-glucopyranoside4-基傘形-β-D-葡糖苷18997-57-4
3,4-Difluoronitrobenzene3,4-二基369-34-6
2'-Deoxycytidine-5'-triphosphoric acid disodium salt三磷酸脫氧胞苷102783-51-7
DI-T-BUTYLPHOSPHINE二叔丁基膦819-19-2
NA鳥糞硫酸
Amstat氨環(huán)酸1197-18-8
Simvastatin伐他汀79902-63-9
2,5-Dimethylphenol2,5-二基酚95-87-4
Taq 酶抗體250U
碘化丙啶苯10mg
胰酶消化液 ( 含 EDTA)100mL
雙熒光素酶報(bào)告基因檢測試劑盒100 次
131022-0.5鏈霉親和素，AP 標(biāo)記0.5mL
101005-100即用型易錯(cuò) PCR 試劑盒100 次
兔抗雞 IgY，辣根過氧化物酶標(biāo)記300μL