永生化人肝癌血管內(nèi)皮細胞系；ECDHCC-1價格質(zhì)量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中，1個月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

永生化人肝癌血管內(nèi)皮細胞系；ECDHCC-1價格操作步驟：

1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱
形態(tài)特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件   10%FBS
傳代方法  無
傳代情況 1:3傳代，3-4天傳1次
凍存條件  C5
支原體檢測 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
STR  陰性
同工酶 
染色體  未做
細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應(yīng)將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

一管式病毒 DNAout    200 次
一管式病毒 DNAout    50 次
一管式病毒 DNA-RNAout    50 次
一管式病毒 RNAout    200 次
一管式病毒 RNAout    50 次
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一管式拭子 DNAout    20 次
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一管式植物 DNAout    500 次
一氧化氮合成酶測試盒    24 T
一氧化氮檢測試劑盒 ( 化學(xué)法 )    100 T
一氧化氮檢測試劑盒 ( 硝酸還原酶法 )    25 T
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一站式 DNA 非變性 PAGE 電泳套裝    30 次2-Atorvastatin
Sulfosuccinimidyl-2-（biotinamido）-ethyl-1，3’-dithiopropionate； Biotin disulfide N-Hydroxysulfosuccinimide esterSulfo-NHS-SS-Biotin
（R）-4-（8-cyclopentyl-7-ethyl-5-methyl-6-oxo-5，6，7，8-tetrahydropteridin-2-ylamino）-3-methoxy-N-（1-methylpiperidin-4-yl）benzamideBI-2536
（2R，4S）-ethyl 2-ethyl-4-（methoxycarbonyl）-6-（trifluoromethyl）-3，4-dihydroquinoline-1（2H）-carboxylate； CP-529414， CP529414， CP 529414Torcetrapib
4-Pyridinecarboxylic acid， 2-phenylhydrazide； NSC-14613PluriSIn 1
E）-N-[（4-Hydroxy-3-methoxyphenyl）methyl]-8-methyl-6-nonenamideCapsaicin
4-[[（2R，3S，4R，5S）-3-（3-chloro-2-fluorophenyl）-4-（4-chloro-2-fluorophenyl）-4-cyano-5-（2，2-dimethylpropyl）pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methoxybenzoic acidRG7388
（2E）-N-hydroxy-3-[4-[[（2-hydroxyethyl）[2-（1H-indol-3-yl）ethyl]amino]methyl]phenyl]-2-propenamide； Dacinostat； NVP-LAQ824LAQ824
8-Hydroxy-7-[（6-sulfo-2-naphthyl）azo]-5-quinolinesulfonic acidNSC-87877
2-（（4-Pyridyl）methyl）amino-N-（3-（trifluoromethyl）phenyl）benzamideAAL-993
Yeast Mitochondria （S. cerevisiae）Yeast Mitochondria （S. cerevisiae）
Heparin SepharoseHeparin Sepharose
Bovine Serum Albumin – Heat Shock， Protease Free， pH 7.0Bovine Serum Albumin – Heat Shock， Protease Free， pH 7.0
NADH Standard （1。5 mg）NADH Standard
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